Ga naar de inhoud
HEK293 suspension-adapted
Weefsel
Nieren

Documenten

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Productnummer 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HEK293 suspensie-aangepaste cellijn is een variant van de menselijke embryonale nier 293 (HEK293) cellen die is aangepast om te groeien in suspensiecultuur in plaats van adherente cultuur. Deze aanpassing is belangrijk voor industriële toepassingen waarbij eiwitproductie op grote schaal nodig is. De cellen behouden veel van de eigenschappen van de originele HEK293-lijn, waaronder een robuuste transiënte transfectie-efficiëntie en de mogelijkheid om tot expressie gebrachte eiwitten post-translationeel te wijzigen op een manier die vergelijkbaar is met die van natieve menselijke cellen.

Deze cellen worden vooral gewaardeerd in de biotechnologische en farmaceutische industrie voor de productie van recombinante eiwitten en virussen voor gentherapie en de ontwikkeling van vaccins. De aanpassing aan de suspensiecultuur maakt schaalvergroting mogelijk en vereenvoudigt het oogstproces, waardoor het geschikter is voor bioprocessing op commerciële schaal. De HEK293 suspensie-geadapteerde cellijn ondersteunt verschillende virale productiesystemen, waaronder adenovirus, lentivirus en adeno-geassocieerd virus (AAV), die cruciaal zijn in therapeutische toepassingen en onderzoek.

In het algemeen is de HEK293 suspensie-aangepaste cellijn een cruciaal hulpmiddel op het gebied van moleculaire biologie en bioprocessing, dat een veelzijdig platform biedt voor de productie van verschillende biologisch actieve moleculen. Het gemak van genetische manipulatie en het vermogen om eiwitten te produceren die correct gevouwen en post-translationeel gemodificeerd zijn volgens menselijke celpatronen, maken het een onmisbare bron in veel geavanceerde therapeutische en onderzoeksomgevingen.

Weefsel
Nieren
Toepassingen
Transfectiegastheer

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Rond
Tumorverwekkend
In naakte muizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HEK293 suspensie-aangepast (Cytion catalogusnummer 300686)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Vitronectine
Eiwit-expressie
CEA negatief, p53 positief
Gevoeligheid voor virussen
Getransformeerd met adenovirus 5 DNA adenovirus 5 DNA

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Panserin 293S (PanBiotech, Duitsland)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Geen supplementen nodig
Dissociatiereagens
Niet vereist
Heruitplanten
Houd de suspensiecellen op een celdichtheid tussen 5 x 105 en 2-3 x 106 cellen/ml in Eppendorf-celkweekflessen op een schudder in een incubator bij 37 °C/5% CO2. Voer een subcultuur uit zodra de celdichtheid 2-3 x 106 cellen/ml heeft bereikt. Maak de cellen voorzichtig los om klontering te voorkomen. Zodra de celdichtheid van 1-2 x 106 cellen/ml is bereikt, verzamel je de cellen door ze gedurende 5 minuten bij 200xg te centrifugeren en gooi je het supernatant weg. Verdun in een geschikt volume vers, voorverwarmd kweekmedium en tel de cellen om informatie te krijgen over de levensvatbaarheid en het aantal cellen. Verzamel de cellen door 5 minuten bij 200xg te centrifugeren en gooi het supernatant weg. Resuspendeer de cellen in een geschikt volume vriesmedium en tel ze nogmaals. De levensvatbaarheid van de cellen moet >>80% zijn, een celdichtheid van 5-10 miljoen cellen/ml wordt aanbevolen. Pipetteer de cellen in vooraf gelabelde cryovials. Gebruik een CoolCell-vriescontainer of een vriezer met geregelde snelheid om een koelsnelheid van 1 °C/min te garanderen.
Zaaidichtheid
5 x 105 cellen/ml
Herstel na ontdooiing
Start de kweken met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie op 2-3 x 106 cellen/ml voor een optimale groei. Incubeer bij 37 °C/5% CO2 op een celschudder bij 100-150 rpm.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Foetus