HEK293-cellen

De HEK293 cellijn, een geïmmortaliseerde epitheelcellijn afgeleid van menselijke embryonale niercellen in de jaren 1970 door Alex van der Eb aan de Universiteit van Utrecht, is een centraal experimenteel model geworden in de moleculaire biologie en biotechnologische toepassingen vanwege de opmerkelijke veelzijdigheid en het gemak van genetische manipulatie.

De transformatie van de HEK293 cellijn omvatte de integratie van een specifiek segment van Adenovirus 5 DNA, waardoor de adenovirale E1A en E1B genen in het celgenoom werden ingebed. Door de modificatie van het adenovirale DNA konden de cellijnen efficiënt vreemd DNA opnemen, een eigenschap die bekend staat als hoge transfectie-efficiëntie. De integratie van viraal DNA in het genoom van de HEK293-cel resulteerde in cellulaire immortalisatie en verbeterde de bruikbaarheid van deze cellen in biotechnologische toepassingen aanzienlijk door de stabiele opname en expressie van exogeen DNA te vergemakkelijken, een proces dat stabiele transfectie wordt genoemd. Dit vermogen maakt de persistente aanwezigheid en functie van vreemde genen in de cellen mogelijk, waardoor HEK293 een hulpmiddel van onschatbare waarde wordt voor genetische studies en biotechnologie.

Als gevolg hiervan zijn HEK293 cellen een fundamenteel hulpmiddel geworden in de biotechnologie voor de productie van recombinante eiwitten, waaronder essentiële therapeutische eiwitten, en ze dienen als robuuste gastheercellen voor het genereren van virale vectoren, met name adenovirale en lentivirale vectoren. HEK 293 cellen zijn cruciaal in de farmaceutische industrie voor high-throughput screening assays, de productie van gentherapieën gericht op specifieke genen gerelateerd aan enkelvoudige genaandoeningen en adenovirale infectiestudies.

In de industriële biotechnologie strekt het nut van de menselijke cellijn HEK293 zich uit tot de productie van recombinante enzymen, de productie van virale vectoren, zoals adenovirale vectoren, de productie van eiwitten en de ontwikkeling van biosensoren. Toxicologisch onderzoek profiteert van de toepassing van de HEK-cellijn bij het beoordelen van de effecten van chemicaliën op de celbiologie, inclusief de effecten op typische niercellen en de mogelijkheden voor gentherapieën. Het vermogen van de onsterfelijke cellijn HEK293 om efficiënt natieve eiwitten te produceren benadrukt hun essentiële rol in medisch onderzoek, inclusief kankeronderzoek en het verkennen van de fundamenten van gentherapie.

HEK293 cellen bieden een uniek platform voor het bestuderen van celbiologie en eiwitten van belang, en overtreffen andere cellijnen in veelzijdigheid en bruikbaarheid in zowel onderzoek als industriële toepassingen. Ter vergelijking: HEK293T cellen, een variant van HEK293, zijn aangepast om de transfectie-efficiëntie te verbeteren, HEK293F cellen zijn aangepast voor suspensiekweek om eiwitproductie op grote schaal te vergemakkelijken en andere zoogdiercellijnen zoals Vero cellen, afgeleid van apennierweefsel, worden voornamelijk gebruikt voor de ontwikkeling van vaccins en virale studies.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring