Κύτταρα HEK293

Η κυτταρική σειρά HEK293, μια αθάνατη σειρά επιθηλιακών κυττάρων που προήλθε από ανθρώπινα εμβρυϊκά νεφρικά κύτταρα τη δεκαετία του 1970 από τον Alex van der Eb στο Πανεπιστήμιο της Ουτρέχτης, έχει γίνει ένα βασικό πειραματικό μοντέλο στη μοριακή βιολογία και τις βιοτεχνολογικές εφαρμογές λόγω της αξιοσημείωτης ευελιξίας της και της ευκολίας γενετικής χειραγώγησης.

Ο μετασχηματισμός της κυτταρικής σειράς HEK293 περιλάμβανε την ενσωμάτωση ενός συγκεκριμένου τμήματος από το DNA του αδενοϊού 5, ενσωματώνοντας τα γονίδια Ε1Α και Ε1Β του αδενοϊού στο κυτταρικό γονιδίωμα. Η τροποποίηση του DNA του αδενοϊού επέτρεψε την ικανότητα των κυτταρικών σειρών να προσλαμβάνουν αποτελεσματικά ξένο DNA, ένα χαρακτηριστικό γνωστό ως υψηλή αποτελεσματικότητα διαμόλυνσης. Η ενσωμάτωση του ιικού DNA στο γονιδίωμα των κυττάρων HEK293 είχε ως αποτέλεσμα την κυτταρική αθανασία και ενίσχυσε σημαντικά τη χρησιμότητα αυτών των κυττάρων σε βιοτεχνολογικές εφαρμογές, διευκολύνοντας τη σταθερή ενσωμάτωση και έκφραση εξωγενούς DNA, μια διαδικασία που ονομάζεται σταθερή διαμόλυνση. Η ικανότητα αυτή επιτρέπει τη μόνιμη παρουσία και λειτουργία ξένων γονιδίων εντός των κυττάρων, καθιστώντας το HEK293 ένα ανεκτίμητο εργαλείο για γενετικές μελέτες και βιοτεχνολογία.

Ως αποτέλεσμα, τα κύτταρα HEK293 έχουν γίνει θεμελιώδης πόρος στη βιοτεχνολογία για την παραγωγή ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών, συμπεριλαμβανομένων ζωτικών θεραπευτικών πρωτεϊνών, και χρησιμεύουν ως ισχυρά κύτταρα ξενιστές για τη δημιουργία ιικών φορέων, ιδίως αδενοϊικών και λεντιϊικών φορέων. Τα κύτταρα HEK 293 είναι ζωτικής σημασίας στη φαρμακοβιομηχανία για δοκιμασίες διαλογής υψηλής απόδοσης, για την παρασκευή γονιδιακών θεραπειών που στοχεύουν σε συγκεκριμένα γονίδια που σχετίζονται με διαταραχές ενός γονιδίου και για μελέτες μόλυνσης από αδενοϊό.

Στη βιομηχανική βιοτεχνολογία, η χρησιμότητα της ανθρώπινης κυτταρικής σειράς HEK293 επεκτείνεται στην παραγωγή ανασυνδυασμένων ενζύμων, στην παραγωγή ιικών φορέων, όπως οι αδενοϊικοί φορείς, στην παραγωγή πρωτεϊνών και στην ανάπτυξη βιοαισθητήρων. Η τοξικολογική έρευνα επωφελείται από την εφαρμογή της κυτταρικής σειράς HEK στην αξιολόγηση των επιπτώσεων των χημικών ουσιών στην κυτταρική βιολογία, συμπεριλαμβανομένων των επιπτώσεων στα τυπικά νεφρικά κύτταρα και των δυνατοτήτων για γονιδιακές θεραπείες. Η ικανότητα της αθάνατης κυτταρικής σειράς HEK293 να παράγει αποτελεσματικά εγγενείς πρωτεΐνες αναδεικνύει τον ουσιαστικό ρόλο της στην ιατρική έρευνα, συμπεριλαμβανομένης της έρευνας για τον καρκίνο και της διερεύνησης των βάσεων της γονιδιακής θεραπείας.

Τα κύτταρα HEK293 προσφέρουν μια μοναδική πλατφόρμα για τη μελέτη της κυτταρικής βιολογίας και των πρωτεϊνών ενδιαφέροντος, ξεπερνώντας άλλες κυτταρικές σειρές σε ευελιξία και χρησιμότητα τόσο σε ερευνητικές όσο και σε βιομηχανικές εφαρμογές. Συγκριτικά, τα κύτταρα HEK293T, μια παραλλαγή του HEK293, τροποποιούνται για να βελτιώσουν την αποτελεσματικότητα της διαμόλυνσης, τα κύτταρα HEK293F προσαρμόζονται για καλλιέργεια εναιωρήματος για να διευκολύνουν την παραγωγή πρωτεϊνών μεγάλης κλίμακας, και άλλες κυτταρικές σειρές θηλαστικών, όπως τα κύτταρα Vero, που προέρχονται από νεφρικό ιστό πιθήκου, χρησιμοποιούνται κυρίως στην ανάπτυξη εμβολίων και σε μελέτες ιών.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης