
- Tissue
- 肾脏
- Synonyms
- Hek293, HEK-293, HEK/293, HEK 293, HEK, 293, 293, 293 HEK, 293 Ad5, Human Embryonic Kidney 293
Documents
HEK293 细胞
Cell line · Product number 300192
The HEK293 cell line, an immortalized epithelial cell line derived from human embryonic kidney cells in the 1970s by Alex van der Eb at the University of ...
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01General information
- Description
HEK293 细胞系是 20 世纪 70 年代由乌得勒支大学的亚历克斯-范德艾布(Alex van der Eb)从人类胚胎肾细胞中提取的一种永生上皮细胞系,由于其显著的多功能性和易于遗传操作的特点,已成为分子生物学和生物技术应用领域的重要实验模型。
对 HEK293 细胞系的改造涉及整合腺病毒 5 DNA 的特定片段,将腺病毒 E1A 和 E1B 基因嵌入细胞基因组。腺病毒 DNA 修饰使细胞系能够高效地吸收外来 DNA,这就是所谓的高转染效率。将病毒 DNA 整合到 HEK293 细胞基因组中可实现细胞永生化,并通过促进外源 DNA 的稳定整合和表达(这一过程被称为稳定转染),大大提高了这些细胞在生物技术应用中的效用。这种能力可使外来基因在细胞内持续存在并发挥功能,使 HEK293 成为遗传研究和生物技术的宝贵工具。
因此,HEK293 细胞已成为生物技术中生产重组蛋白(包括重要的治疗蛋白)的基本资源,也是生成病毒载体(尤其是腺病毒和慢病毒载体)的强大宿主细胞。HEK 293 细胞在制药业中举足轻重,可用于高通量筛选试验、针对与单基因疾病相关的特定基因的基因疗法的生产以及腺病毒感染研究。
在工业生物技术领域,HEK293 人体细胞系的用途扩展到重组酶的生产、病毒载体(如腺病毒载体)的生产、蛋白质的生产和生物传感器的开发。在评估化学品对细胞生物学的影响(包括对典型肾细胞的影响和基因疗法的潜力)时,HEK 细胞系的应用使毒理学研究受益匪浅。HEK293 长生细胞系能高效地产生原生蛋白质,这突出表明了它在医学研究中的重要作用,包括癌症研究和探索基因疗法的基础。
HEK293 细胞为研究细胞生物学和感兴趣的蛋白质提供了一个独特的平台,在研究和工业应用的多功能性和实用性方面超越了其他细胞系。相比之下,HEK293 的变种 HEK293T 细胞经过改良后可提高转染效率,HEK293F 细胞可用于悬浮培养以促进大规模蛋白质生产,而其他哺乳动物细胞系,如源自猴肾组织的 Vero 细胞,主要用于疫苗开发和病毒研究。
- Tissue
- 肾脏
- Applications
- 转染宿主
- Synonyms
- Hek293
- HEK-293
- HEK/293
- HEK 293
- HEK
- 293
- 293
- 293 HEK
- 293 Ad5
- Human Embryonic Kidney 293
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HEK293 embryonic kidney-derived cell line contains adenovirus-5 E1A/E1B sequences due to transformation but does not release infectious virus, enabling high proliferative capacity. The modification is stably present in embryonal kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Tumourigenic
- 裸鼠
- Ploidy status
- 30% 的 HEK293 细胞具有 64 条模式染色体的低倍体核型。4.2%的细胞具有更高的倍性。
- Doubling time
- 30 小时
04Identifiers
- Citation
- HEK293(Cytion 目录号 300192)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0045
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Vitronectin
- Protein expression
- CEA 阴性,p53 阳性
- Virus susceptibility
- 用腺病毒 5 DNA 进行转化 腺病毒 5 DNA
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合层。
- Fluid renewal
- 每周 2 次
- Post-thaw recovery
- 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 胎儿
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes





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