תאי HEK293

קו התאים HEK293, קו תאים אפיתלליים מהונדסים שפותח בשנות ה-70 על ידי אלכס ואן דר אב מאוניברסיטת אוטרכט מתאי כליה עובריים אנושיים, הפך למודל ניסויי מרכזי בביולוגיה מולקולרית וביישומים ביוטכנולוגיים בזכות הרבגוניות המדהימה שלו וקלות המניפולציה הגנטית.

השינוי בקו התאים HEK293 כלל שילוב של קטע ספציפי מה-DNA של אדנו-וירוס 5, תוך הטמעת הגנים E1A ו-E1B של האדנו-וירוס בגנום התאי. שינוי ה-DNA של האדנו-וירוס איפשר לקווי התאים לקלוט DNA זר ביעילות, תכונה המכונה "יעילות טרנספקציה גבוהה". שילוב ה-DNA הנגיפי בגנום התא HEK293 הביא להנצחת התאים ושיפר משמעותית את השימושיות שלהם ביישומים ביוטכנולוגיים, בכך שהקל על שילוב וביטוי יציבים של DNA אקסוגני, תהליך המכונה טרנספקציה יציבה. יכולת זו מאפשרת נוכחות ותפקוד מתמשכים של גנים זרים בתוך התאים, מה שהופך את HEK293 לכלי יקר ערך למחקרים גנטיים וביוטכנולוגיה.

כתוצאה מכך, תאי HEK293 הפכו למשאב בסיסי בביוטכנולוגיה לייצור חלבונים רקומביננטיים, כולל חלבונים טיפוליים חיוניים, ומשמשים כתאי מארח חזקים ליצירת וקטורים נגיפיים, במיוחד וקטורים אדנו-ויראליים ולנטי-ויראליים. תאי HEK 293 הם מרכזיים בתעשיית התרופות לבדיקות סריקה בעלות תפוקה גבוהה, לייצור טיפולים גנטיים המכוונים לגנים ספציפיים הקשורים להפרעות גנטיות בודדות, ולמחקרים על זיהום אדנו-ויראלי.

בביוטכנולוגיה תעשייתית, השימוש בקו התאים האנושיים HEK293 משתרע על ייצור אנזימים רקומביננטיים, ייצור וקטורים נגיפיים, כגון וקטורים אדנו-נגיפיים, ייצור חלבונים ופיתוח ביוסנסורים. מחקר טוקסיקולוגי נהנה מיישום קו התאים HEK בהערכת ההשפעות של כימיקלים על ביולוגיה תאית, כולל ההשפעות על תאי כליה טיפוסיים והפוטנציאל לטיפולים גנטיים. היכולת של קו התאים האלמותי HEK293 לייצר ביעילות חלבונים מקוריים מדגישה את תפקידם החיוני במחקר רפואי, כולל מחקר סרטן וחקר היסודות של טיפול גנטי.

תאי HEK293 מציעים פלטפורמה ייחודית לחקר ביולוגיה תאית וחלבונים מעניינים, ועולים על קווי תאים אחרים בגמישותם ובשימושיותם הן במחקר והן ביישומים תעשייתיים. לעומת זאת, תאי HEK293T, וריאנט של HEK293, עברו שינוי כדי לשפר את יעילות הטרנספקציה, תאי HEK293F הותאמו לתרבית בתמיסה כדי להקל על ייצור חלבונים בקנה מידה גדול, ושורות תאים יונקיים אחרים, כגון תאי Vero, שמקורם ברקמת כליה של קוף, משמשים בעיקר בפיתוח חיסונים ובמחקרים ויראליים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו