HEK293細胞

HEK293細胞株は、1970年代にユトレヒト大学のAlex van der Ebによってヒト胚性腎臓細胞から誘導された不死化上皮細胞株で、その驚くべき多用途性と遺伝子操作の容易さから、分子生物学やバイオテクノロジー応用において極めて重要な実験モデルとなっている。

HEK293細胞株の形質転換は、アデノウイルスE1AおよびE1B遺伝子を細胞ゲノム内に組み込み、アデノウイルス5DNAの特定のセグメントを組み込むことを含んでいた。アデノウイルスのDNA改変により、細胞株は外来DNAを効率的に取り込むことができるようになり、これは高いトランスフェクション効率として知られる特徴である。HEK293細胞ゲノムへのウイルスDNAの組み込みは、細胞の不死化をもたらし、安定なトランスフェクションと呼ばれる外来DNAの安定な組み込みと発現を促進することにより、バイオテクノロジー応用におけるこれらの細胞の有用性を著しく高めた。この能力は、細胞内に外来遺伝子を持続的に存在させ、機能させることを可能にし、HEK293を遺伝学的研究とバイオテクノロジーのための貴重なツールにしている。

その結果、HEK293細胞は、重要な治療用タンパク質を含む組換えタンパク質の産生や、ウイルスベクター、特にアデノウイルスベクターやレンチウイルスベクターの生成のための強固な宿主細胞として、バイオテクノロジーにおける基本的なリソースとなっている。HEK293細胞は、製薬産業において、ハイスループットスクリーニングアッセイ、単一遺伝子障害に関連する特定の遺伝子を標的とした遺伝子治療の製造、アデノウイルス感染研究において極めて重要である。

工業用バイオテクノロジーでは、ヒト細胞株HEK293の有用性は、組換え酵素生産、アデノウイルスベクターなどのウイルスベクター生産、タンパク質生産、バイオセンサーの開発にも及んでいる。毒物学研究では、典型的な腎臓細胞への影響や遺伝子治療の可能性など、化学物質が細胞生物学に及ぼす影響を評価する上で、HEK細胞株の応用から恩恵を受けている。不死細胞株HEK293のネイティブタンパク質を効率的に産生する能力は、癌研究や遺伝子治療の基礎の探求を含む医学研究において、その重要な役割を強調している。

HEK293細胞は、細胞生物学と目的のタンパク質を研究するためのユニークなプラットフォームを提供し、研究および産業応用の両方における汎用性と有用性において他の細胞株を凌駕している。比較すると、HEK293の変種であるHEK293T細胞はトランスフェクション効率を高めるために改変され、HEK293F細胞は大規模なタンパク質生産を容易にするために懸濁培養に適応され、サルの腎臓組織由来のVero細胞などの他の哺乳類細胞株は、主にワクチン開発やウイルス研究に利用されている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。