HEK293-celler

HEK293-cellinjen, en odödlig epitelcellinje som på 1970-talet framställdes av Alex van der Eb vid universitetet i Utrecht från mänskliga embryonala njurceller, har blivit en central experimentell modell inom molekylärbiologi och biotekniska tillämpningar tack vare sin anmärkningsvärda mångsidighet och enkla genetiska manipulation.

Transformationen av HEK293-cellinjen innebar att ett specifikt segment av DNA från Adenovirus 5 integrerades, varvid de adenovirala E1A- och E1B-generna bäddades in i cellgenomet. Den adenovirala DNA-modifieringen möjliggjorde cellinjernas förmåga att effektivt ta upp främmande DNA, en egenskap som kallas hög transfektionseffektivitet. Integreringen av viralt DNA i HEK293-cellernas genom resulterade i cellulär odödlighet och förbättrade avsevärt dessa cellers användbarhet i biotekniska tillämpningar genom att underlätta stabil inkorporering och uttryck av exogent DNA, en process som kallas stabil transfektion. Denna förmåga gör att främmande gener kan finnas kvar och fungera i cellerna, vilket gör HEK293 till ett ovärderligt verktyg för genetiska studier och bioteknik.

HEK293-celler har därför blivit en grundläggande resurs inom biotekniken för produktion av rekombinanta proteiner, inklusive viktiga terapeutiska proteiner, och som robusta värdceller för generering av virusvektorer, särskilt adenovirala och lentivirala vektorer. HEK 293-celler är centrala inom läkemedelsindustrin för screeninganalyser med hög kapacitet, tillverkning av genterapier inriktade på specifika gener i samband med sjukdomar som orsakas av enstaka gener samt studier av adenoviral infektion.

Inom industriell bioteknik används den mänskliga cellinjen HEK293 för produktion av rekombinanta enzymer, produktion av virala vektorer, t.ex. adenovirala vektorer, proteinproduktion och utveckling av biosensorer. Toxikologisk forskning drar nytta av HEK-cellinjen för att bedöma kemikaliers inverkan på cellbiologin, inklusive effekterna på typiska njurceller och potentialen för genterapier. Den odödliga cellinjen HEK293:s förmåga att effektivt producera nativa proteiner understryker dess viktiga roll inom medicinsk forskning, inklusive cancerforskning och utforskning av grunderna för genterapi.

HEK293-celler erbjuder en unik plattform för studier av cellbiologi och intressanta proteiner, och överträffar andra cellinjer i fråga om mångsidighet och användbarhet inom både forskning och industriella tillämpningar. Som jämförelse kan nämnas att HEK293T-celler, en variant av HEK293, modifieras för att förbättra transfektionseffektiviteten, att HEK293F-celler anpassas för suspensionskultur för att underlätta storskalig proteinproduktion och att andra cellinjer från däggdjur, t.ex. Vero-celler, som härrör från njurvävnad från apor, främst används för vaccinutveckling och virusstudier.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring