Gå direkt till innehållet
HEK293-F-celler
Vävnad
Njurar
Synonymer
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

HEK293-F-celler

Cell line · Produktnummer 300260

HEK293-F-celler är en snabbväxande, mycket lätttransfekterbar sublinje som härstammar från cellinjen human embryonic kidney 293 (HEK293). Beteckningen ”F” anger...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HEK293-F-celler är en snabbväxande, mycket transfekterbar sublinje som härrör från HEK293-cellinjen (Human Embryonic Kidney 293). Beteckningen "F" indikerar att dessa celler har anpassats för tillväxt i suspensionskulturer, vilket gör dem särskilt användbara för storskalig proteinproduktion. Cellerna växer i en mängd olika serumfria medier, vilket underlättar skalbara processer inom bioteknologiska och farmaceutiska tillämpningar. HEK293-F-cellerna behåller den epitelliknande morfologin hos den ursprungliga HEK293-linjen och hålls i suspension utan att behöva fästas på ett fast substrat.

Dessa celler är mycket effektiva när det gäller att uttrycka rekombinanta proteiner och används ofta vid produktion av virala vektorer för genterapi, inklusive adenovirala, lentivirala och retrovirala vektorer. Deras robusta tillväxt i suspension och enkla transfektion gör dem idealiska för användning i protokoll för transient transfektion, där de kan producera höga utbyten av protein inom några dagar efter transfektion. Denna egenskap är avgörande för snabba produktionscykler inom forskning och industri. HEK293-F-cellernas anpassningsförmåga till olika tillväxtförhållanden och deras kapacitet för odling med hög densitet ökar deras användbarhet i bioprocessmiljöer.

Vävnad
Njurar
Ansökningar
Värd för transfektion
Synonymer
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Upphängning
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
I nakna möss
Fördubblingstid
30 timmar

04Identifierare

Källa
HEK293-F (Cytion katalognummer 300260)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
Vitronektin
Proteinexpression
CEA-negativ, p53-positiv
Virus
Transformerad med adenovirus 5 DNA adenovirus 5 DNA

06Hantering och odling

Odlingsmedium
CD293 (Thermo)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2 ger ett konfluent skikt efter cirka 4 dagar.
Vätskeförnyelse
2 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Foster