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Cellules HEK293-F
Tissu
Rein
Synonymes
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Documents

Cellules HEK293-F

Cell line · Référence du produit 300260

Les cellules HEK293-F constituent une sous-lignée à croissance rapide et hautement transfectable, dérivée de la lignée cellulaire rénale embryonnaire humaine 293 (HEK293). La lettre « F » indique...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules HEK293-F sont une sous-ligne à croissance rapide et hautement transfectable dérivée de la lignée cellulaire de rein embryonnaire humain 293 (HEK293). La désignation "F" indique que ces cellules ont été adaptées à la croissance en suspension, ce qui les rend particulièrement utiles pour la production de protéines à grande échelle. Les cellules se développent dans une variété de milieux sans sérum, ce qui facilite les processus évolutifs dans les applications biotechnologiques et pharmaceutiques. Les cellules HEK293-F conservent la morphologie épithéliale de la lignée cellulaire parentale HEK293 et sont maintenues en suspension sans qu'il soit nécessaire de les fixer à un substrat solide.

Ces cellules sont très efficaces pour exprimer des protéines recombinantes et sont largement utilisées dans la production de vecteurs viraux pour la thérapie génique, y compris les vecteurs adénoviraux, lentiviraux et rétroviraux. Leur croissance robuste en suspension et leur facilité de transfection les rendent idéales pour les protocoles de transfection transitoire, où elles peuvent produire des rendements élevés de protéines en quelques jours après la transfection. Cette caractéristique est essentielle pour les cycles de production rapides dans la recherche et l'industrie. L'adaptabilité des cellules HEK293-F à diverses conditions de croissance et leur capacité de culture à haute densité renforcent leur utilité dans les environnements de biotraitement.

Tissu
Rein
Applications
Hôte de transfection
Synonymes
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Suspension
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Chez la souris nude
Temps de doublement
30 heures

04Identifiants

Référence
HEK293-F (numéro de catalogue Cytion 300260)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Vitronectine
Expression des protéines
CEA négatif, p53 positif
Virus
Transformé avec l'ADN de l'adénovirus 5 ADN de l'adénovirus 5

06Manipulation et culture

Milieu de culture
CD293 (Thermo)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 donnera une couche confluente en environ 4 jours.
Renouvellement des fluides
2 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Fœtus