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Cellules HEK293 EBNA
Tissu
Rein embryonnaire
Synonymes
HEK293-EBNA, 293 c18, 293c18, HEK 293 c18, HEK-293 c18, HEK293-EBNA1, HEK-293-EBNA, HEK 293-EBNA, HEK 293 EBNA, HEK293EBNA, 293 EBNA, 293-EBNA1, 293-EBNA, 293/EBNA, 293EBNA, EBNA-293, EBNA293, HEK293E, HEK/EBNA, HEK-EBNA, HEK.EBNA, 293/EBNA-1, 298E

Documents

Cellules HEK293 EBNA

Cell line · Référence du produit 300264

La lignée cellulaire HEK293 EBNA est issue de la lignée HEK293 d'origine, elle-même dérivée de cellules rénales embryonnaires humaines cultivées in vitro...

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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire HEK293 EBNA est un dérivé de la lignée HEK293 originale, elle-même dérivée de cellules rénales embryonnaires humaines cultivées dans des tissus. Cette sous-ligne particulière a été conçue pour exprimer de manière stable l'antigène nucléaire du virus d'Epstein-Barr-1 (EBNA-1). L'expression de l'EBNA-1 permet la réplication épisomale des plasmides qui portent l'origine de réplication du virus d'Epstein-Barr, ce qui rend les cellules HEK293 EBNA particulièrement utiles pour la production de protéines recombinantes et pour les études d'expression génique impliquant des vecteurs épisomaux.

Les cellules HEK293 EBNA conservent de nombreuses caractéristiques des cellules HEK293 mères, notamment leur adhérence au plastique de culture cellulaire et leur croissance robuste dans les milieux de culture standard des cellules de mammifères. L'ajout d'EBNA-1 élargit leur utilité dans la recherche et les applications biotechnologiques, car il renforce la capacité des cellules à propager des plasmides avec l'origine EBV de réplication des plasmides. Cette caractéristique est essentielle pour produire des protéines recombinantes stables et à haut rendement, ce qui est indispensable à la fois pour la recherche et pour la production à l'échelle industrielle.

Tissu
Rein embryonnaire
Synonymes
  • HEK293-EBNA
  • 293 c18
  • 293c18
  • HEK 293 c18
  • HEK-293 c18
  • HEK293-EBNA1
  • HEK-293-EBNA
  • HEK 293-EBNA
  • HEK 293 EBNA
  • HEK293EBNA
  • 293 EBNA
  • 293-EBNA1
  • 293-EBNA
  • 293/EBNA
  • 293EBNA
  • EBNA-293
  • EBNA293
  • HEK293E
  • HEK/EBNA
  • HEK-EBNA
  • HEK.EBNA
  • 293/EBNA-1
  • 298E

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This HEK293 EBNA cell line contains EBV nuclear antigen (EBNA) sequences enabling episomal replication of EBV-derived plasmids, without releasing infectious virus particles. The modification is stably present in embryonic kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
HEK293 EBNA (numéro de catalogue Cytion 300264)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6974

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
EBNA1
Virus
Adénovirus 5 (transformant), EBV (exprime EBNA1)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Fœtus