Премини към съдържанието
Клетки HEK293 EBNA
Тъкан
Ембрионален бъбрек
Синоними
HEK293-EBNA, 293 c18, 293c18, HEK 293 c18, HEK-293 c18, HEK293-EBNA1, HEK-293-EBNA, HEK 293-EBNA, HEK 293 EBNA, HEK293EBNA, 293 EBNA, 293-EBNA1, 293-EBNA, 293/EBNA, 293EBNA, EBNA-293, EBNA293, HEK293E, HEK/EBNA, HEK-EBNA, HEK.EBNA, 293/EBNA-1, 298E

Документи

Клетки HEK293 EBNA

Cell line · Номер на продукта 300264

Клетъчната линия HEK293 EBNA е производна на оригиналната линия HEK293, която от своя страна е получена от човешки ембрионални бъбречни клетки, отгледани в тъканна култура....

€650.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия HEK293 EBNA е производна на оригиналната линия HEK293, която е получена от човешки ембрионални бъбречни клетки, отглеждани в тъканна култура. Тази конкретна подлиния е създадена, за да експресира стабилно ядрения антиген-1 на вируса на Епщайн-Барр (EBNA-1). Експресията на EBNA-1 позволява епизомална репликация на плазмиди, които носят произхода на репликация на EBV, което прави клетките HEK293 EBNA особено ценни за производството на рекомбинантни протеини и за изследвания на генната експресия, включващи епизомални вектори.

Клетките HEK293 EBNA запазват много от характеристиките на изходните клетки HEK293, включително прилепването им към пластмаса за клетъчни култури и стабилния им растеж в стандартни среди за клетъчни култури от бозайници. Добавянето на EBNA-1 разширява полезността им в изследователски и биотехнологични приложения, тъй като повишава способността на клетките да размножават плазмиди с произход на плазмидната репликация EBV. Тази характеристика е от решаващо значение за производството на стабилни рекомбинантни протеини с висока производителност, което е от съществено значение както за изследователски цели, така и за промишлено производство.

Тъкан
Ембрионален бъбрек
Синоними
  • HEK293-EBNA
  • 293 c18
  • 293c18
  • HEK 293 c18
  • HEK-293 c18
  • HEK293-EBNA1
  • HEK-293-EBNA
  • HEK 293-EBNA
  • HEK 293 EBNA
  • HEK293EBNA
  • 293 EBNA
  • 293-EBNA1
  • 293-EBNA
  • 293/EBNA
  • 293EBNA
  • EBNA-293
  • EBNA293
  • HEK293E
  • HEK/EBNA
  • HEK-EBNA
  • HEK.EBNA
  • 293/EBNA-1
  • 298E

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HEK293 EBNA cell line contains EBV nuclear antigen (EBNA) sequences enabling episomal replication of EBV-derived plasmids, without releasing infectious virus particles. The modification is stably present in embryonic kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Епителиален

04Идентификатори

Източник
HEK293 EBNA (каталожен номер 300264 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_6974

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
EBNA1
Вируси
Аденовирус 5 (трансформиран), EBV (експресира EBNA1)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Плод