Cellule HEK293 EBNA

La linea cellulare HEK293 EBNA è un derivato della linea originale HEK293, a sua volta derivata da cellule renali embrionali umane coltivate in coltura tissutale. Questa particolare sotto-linea è stata ingegnerizzata per esprimere stabilmente l'antigene nucleare-1 del virus di Epstein-Barr (EBNA-1). L'espressione di EBNA-1 consente la replicazione episomale di plasmidi che portano l'origine di replicazione del virus EBV, rendendo le cellule HEK293 EBNA particolarmente preziose per la produzione di proteine ricombinanti e per gli studi di espressione genica con vettori episomali.

Le cellule HEK293 EBNA mantengono molte delle caratteristiche delle cellule parentali HEK293, tra cui l'aderenza alla plastica delle colture cellulari e la crescita robusta nei terreni di coltura standard dei mammiferi. L'aggiunta di EBNA-1 ne espande l'utilità nella ricerca e nelle applicazioni biotecnologiche, in quanto aumenta la capacità delle cellule di propagare plasmidi con l'origine EBV della replicazione plasmidica. Questa caratteristica è fondamentale per la produzione di proteine ricombinanti stabili e ad alta resa, essenziale sia per la ricerca che per la produzione su scala industriale.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia