HEK293A

La linea cellulare HEK293A, un derivato delle cellule del rene embrionale umano 293 (HEK293), rappresenta uno strumento specializzato nella ricerca virologica e di terapia genica, in particolare per la produzione, l'amplificazione e la titolazione di adenovirus incompetenti alla replicazione. Queste cellule presentano una morfologia piatta, che facilita notevolmente l'esame microscopico e i processi di titolazione, rendendo più semplice il conteggio e la valutazione delle particelle virali.

Una caratteristica fondamentale della linea cellulare HEK293A è l'integrazione stabile del gene E1 dell'adenovirus nel suo genoma. Questa integrazione è fondamentale perché fornisce il macchinario trascrizionale necessario per l'espressione delle proteine E1, in particolare E1a ed E1b. La presenza di queste proteine è essenziale per la replicazione dei vettori adenovirali nella cellula. La proteina E1a funziona principalmente per attivare la trascrizione del genoma dell'adenovirus, mentre le proteine E1b sono coinvolte nella replicazione virale e nell'interruzione del ciclo cellulare.

L'utilità delle cellule HEK293A va oltre il semplice supporto alla replicazione virale. Queste cellule facilitano la produzione efficiente di preparati virali ad alto titolo e di alta qualità, essenziali sia per la ricerca di base che per le applicazioni terapeutiche. La robusta capacità di replicazione e la facilità di manipolazione di questa linea cellulare permettono ai ricercatori di selezionare e sviluppare costrutti adenovirali con una precisione e un'efficienza senza precedenti.

In sintesi, la linea cellulare HEK293A è una risorsa indispensabile nel campo della virologia e della terapia genica. La sua capacità di esprimere stabilmente le proteine E1 e di supportare la replicazione adenovirale la rende uno strumento prezioso per i ricercatori che vogliono produrre e manipolare vettori adenovirali. Le caratteristiche della linea cellulare consentono di generare in modo efficiente vettori virali, fondamentali per il progresso della ricerca e per potenziali interventi terapeutici.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia