Gå til innholdet
HEK293A
Vev
Embryonal nyre
Synonymer
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

Dokumenter

HEK293A

Cell line · Produktnummer 305070

HEK293A-cellelinjen, som er avledet fra humane embryonale nyreceller 293 (HEK293), er et spesialisert verktøy innen virologisk forskning og genterapiforskning...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HEK293A-cellelinjen, som er et derivat av de humane embryonale 293-cellene (HEK293), er et spesialisert verktøy i virologisk og genterapeutisk forskning, særlig når det gjelder produksjon, amplifisering og titrering av replikasjonsinkompetente adenovirus. Disse cellene har en flat morfologi, noe som er til stor hjelp i mikroskopiske undersøkelser og titreringsprosesser, og som gjør det enklere å telle og vurdere viruspartikler.

Et sentralt trekk ved HEK293A-cellelinjen er den stabile integrasjonen av adenovirus E1-genet i genomet. Denne integrasjonen er kritisk, ettersom den gir det nødvendige transkripsjonsmaskineriet for uttrykk av E1-proteiner, spesielt E1a og E1b. Tilstedeværelsen av disse proteinene er avgjørende for replikasjonen av adenovirusvektorer i cellen. E1a-proteinet aktiverer først og fremst transkripsjonen av adenovirusgenomet, mens E1b-proteiner er involvert i virusreplikasjon og forstyrrelse av cellesyklusen.

HEK293A-celler kan brukes til mer enn bare å støtte virusreplikasjon. Disse cellene muliggjør effektiv produksjon av viruspreparater med høy titer og høy kvalitet, noe som er avgjørende for både grunnforskning og terapeutiske anvendelser. Cellelinjens robuste replikasjonskapasitet og enkle håndtering gjør det mulig for forskere å screene og utvikle adenovirale konstruksjoner med enestående presisjon og effektivitet.

HEK293A-cellelinjen er en uunnværlig ressurs innen virologi og genterapi. Cellelinjens evne til å uttrykke E1-proteiner stabilt og støtte adenoviral replikasjon gjør den til et verdifullt verktøy for forskere som ønsker å produsere og manipulere adenovirale vektorer. Cellelinjens egenskaper gjør det mulig å generere virale vektorer på en effektiv måte, noe som er avgjørende for å fremme forskning og potensielle terapeutiske intervensjoner.

Vev
Embryonal nyre
Synonymer
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293A (Cytion katalognummer 305070)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
Foster