HEK293A

A linhagem celular HEK293A, derivada das células renais embrionárias humanas 293 (HEK293), constitui uma ferramenta especializada na pesquisa virológica e em terapia gênica, particularmente na produção, amplificação e titulação de adenovírus incapazes de se replicar. Essas células apresentam uma morfologia plana, o que auxilia significativamente nos processos de exame microscópico e titulação, simplificando a contagem e a avaliação das partículas virais.

Uma característica fundamental da linha celular HEK293A é a integração estável do gene E1 do adenovírus em seu genoma. Essa integração é essencial, pois fornece a maquinaria transcricional necessária para a expressão das proteínas E1, especificamente E1a e E1b. A presença dessas proteínas é essencial para a replicação de vetores adenovirais na célula. A proteína E1a tem como função principal ativar a transcrição do genoma do adenovírus, enquanto as proteínas E1b estão envolvidas na replicação viral e na interrupção do ciclo celular.

A utilidade das células HEK293A vai além do simples suporte à replicação viral. Essas células facilitam a produção eficiente de preparações virais de alto título e alta qualidade, essenciais tanto para a pesquisa básica quanto para aplicações terapêuticas. A robusta capacidade de replicação da linhagem celular e a facilidade de manuseio permitem que os pesquisadores selecionem e desenvolvam construções adenovirais com precisão e eficiência sem precedentes.

Em resumo, a linhagem celular HEK293A é um recurso indispensável no campo da virologia e da terapia gênica. Sua capacidade de expressar proteínas E1 de forma estável e de apoiar a replicação adenoviral torna-a uma ferramenta valiosa para pesquisadores que buscam produzir e manipular vetores adenovirais. As características da linha celular permitem a geração eficiente de vetores virais, crucial para o avanço da pesquisa e de possíveis intervenções terapêuticas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.