HEK293A

La lignée cellulaire HEK293A, dérivée des cellules rénales embryonnaires humaines 293 (HEK293), constitue un outil spécialisé dans la recherche en virologie et en thérapie génique, notamment pour la production, l’amplification et le titrage d’adénovirus incapables de se répliquer. Ces cellules présentent une morphologie aplatie, ce qui facilite grandement l’examen au microscope et les processus de titrage, simplifiant ainsi le comptage et l’évaluation des particules virales.

Une caractéristique essentielle de la lignée cellulaire HEK293A est l’intégration stable du gène E1 de l’adénovirus dans son génome. Cette intégration est cruciale, car elle fournit l’appareil transcriptionnel nécessaire à l’expression des protéines E1, plus précisément E1a et E1b. La présence de ces protéines est essentielle à la réplication des vecteurs adénoviraux dans la cellule. La protéine E1a a pour fonction principale d’activer la transcription du génome de l’adénovirus, tandis que les protéines E1b participent à la réplication virale et à la perturbation du cycle cellulaire.

L’utilité des cellules HEK293A va au-delà du simple soutien à la réplication virale. Ces cellules facilitent la production efficace de préparations virales de haute qualité et à titre élevé, essentielles tant pour la recherche fondamentale que pour les applications thérapeutiques. La solide capacité de réplication de la lignée cellulaire et sa facilité de manipulation permettent aux chercheurs de cribler et de développer des constructions adénovirales avec une précision et une efficacité sans précédent.

En résumé, la lignée cellulaire HEK293A constitue une ressource indispensable dans le domaine de la virologie et de la thérapie génique. Sa capacité à exprimer de manière stable les protéines E1 et à soutenir la réplication adénovirale en fait un outil précieux pour les chercheurs qui cherchent à produire et à manipuler des vecteurs adénoviraux. Les caractéristiques de cette lignée cellulaire permettent la production efficace de vecteurs viraux, ce qui est crucial pour faire progresser la recherche et les interventions thérapeutiques potentielles.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.