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HEK293A
ティッシュ
胚性腎臓
同義語
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

HEK293A

Cell line · 製品番号 305070

ヒト胚腎293(HEK293)細胞から樹立されたHEK293A細胞株は、ウイルス学および遺伝子治療の研究において、重要なツールとなっている...

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01概要

説明

HEK293A細胞株は、ヒト胚性腎臓293(HEK293)細胞の誘導体であり、ウイルス学的研究および遺伝子治療研究、特に複製不能アデノウイルスの産生、増幅、滴定における特殊なツールである。これらの細胞は平坦な形態を示し、顕微鏡検査と滴定プロセスを著しく助け、ウイルス粒子の計数と評価をより簡単にする。

HEK293A細胞株の極めて重要な特徴は、アデノウイルスE1遺伝子をゲノムに安定的に組み込むことである。この統合は、E1タンパク質、特にE1aとE1bの発現に必要な転写機構を提供するために重要である。これらのタンパク質の存在は、アデノウイルスベクターの細胞内での複製に不可欠である。E1aタンパク質は主にアデノウイルスゲノムの転写を活性化する機能を持ち、一方E1bタンパク質はウイルス複製と細胞周期の破壊に関与する。

HEK293A細胞の有用性は、単にウイルス複製をサポートするだけにとどまらない。HEK293A細胞は、基礎研究と治療応用の両方に不可欠な、高力価で高品質のウイルス製剤の効率的生産を促進する。この細胞株の強固な複製能と扱いやすさにより、研究者はアデノウイルス構築物を前例のない正確さと効率でスクリーニングし、開発することができる。

要約すると、HEK293A細胞株はウイルス学および遺伝子治療の分野において欠くことのできないリソースである。E1タンパク質を安定に発現し、アデノウイルスの複製をサポートするその能力は、アデノウイルスベクターの生産と操作を目指す研究者にとって貴重なツールとなる。この細胞株の特性により、ウイルスベクターの効率的な作製が可能となり、研究の進展や治療的介入の可能性にとって極めて重要である。

ティッシュ
胚性腎臓
同義語
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮

04識別子

引用
HEK293A(Cytion カタログ番号 305070)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_6910

05取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
胎児