Gå direkt till innehållet
HEK293A
Vävnad
Embryonal njure
Synonymer
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

HEK293A

Cell line · Produktnummer 305070

Cellinjen HEK293A, som härstammar från cellerna i den humana embryonala njuren 293 (HEK293), utgör ett specialiserat verktyg inom virologisk forskning och genterapiforskning...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HEK293A-cellinjen, som är ett derivat av HEK293-cellerna (Human Embryonic Kidney 293), är ett specialiserat verktyg inom virologisk forskning och genterapi, särskilt vid produktion, amplifiering och titrering av replikationsinkompetenta adenovirus. Dessa celler har en platt morfologi, vilket underlättar den mikroskopiska undersökningen och titreringsprocesserna och gör det enklare att räkna och bedöma viruspartiklar.

En central egenskap hos HEK293A-cellinjen är den stabila integrationen av adenovirus E1-genen i dess genom. Denna integration är kritisk eftersom den tillhandahåller det nödvändiga transkriptionsmaskineriet för uttryck av E1-proteiner, särskilt E1a och E1b. Förekomsten av dessa proteiner är avgörande för replikationen av adenovirusvektorer i cellen. E1a-proteinet fungerar främst för att aktivera transkription av adenovirusgenomet, medan E1b-proteiner är involverade i viral replikation och cellcykelstörning.

Användningen av HEK293A-celler sträcker sig längre än till att bara stödja virusreplikation. Dessa celler underlättar en effektiv produktion av högkvalitativa viruspreparat med hög titer, vilket är viktigt för både grundforskning och terapeutiska tillämpningar. Cellinjens robusta replikeringskapacitet och enkla hantering gör det möjligt för forskare att screena och utveckla adenovirala konstruktioner med oöverträffad precision och effektivitet.

Sammanfattningsvis är HEK293A-cellinjen en oumbärlig resurs inom virologi och genterapi. Dess förmåga att stabilt uttrycka E1-proteiner och stödja adenoviral replikation gör den till ett värdefullt verktyg för forskare som vill producera och manipulera adenovirala vektorer. Cellinjens egenskaper möjliggör en effektiv generering av virala vektorer, vilket är avgörande för att främja forskning och potentiella terapeutiska interventioner.

Vävnad
Embryonal njure
Synonymer
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
HEK293A (Cytion katalognummer 305070)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
Foster