Pereiti prie turinio
HEK293A
Audinys
Embrioninis inkstas
Sinonimai
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

Dokumentai

HEK293A

Cell line · Prekės numeris 305070

HEK293A ląstelių linija, kilusi iš žmogaus embrioninių inkstų 293 (HEK293) ląstelių, yra specializuota priemonė virusologijos ir genų terapijos tyrimuose...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HEK293A ląstelių linija, žmogaus embrioninio inksto 293 (HEK293) ląstelių darinys, yra specializuota virusologinių ir genų terapijos tyrimų priemonė, ypač replikacijos nekompetentingų adenovirusų gamybai, amplifikavimui ir titravimui. Šios ląstelės pasižymi plokščia morfologija, kuri labai palengvina mikroskopinio tyrimo ir titravimo procesus, todėl paprasčiau suskaičiuoti ir įvertinti viruso daleles.

Pagrindinė HEK293A ląstelių linijos savybė yra stabili adenoviruso E1 geno integracija į jos genomą. Ši integracija yra labai svarbi, nes ji užtikrina transkripcijos mechanizmą, būtiną E1 baltymų, ypač E1a ir E1b, raiškai. Šių baltymų buvimas yra būtinas adenovirusinių vektorių replikacijai ląstelėje. E1a baltymas pirmiausia atlieka adenoviruso genomo transkripcijos aktyvavimo funkciją, o E1b baltymai dalyvauja viruso replikacijoje ir ląstelių ciklo sutrikdyme.

HEK293A ląstelės naudingos ne tik virusų replikacijai palaikyti. Šios ląstelės palengvina veiksmingą didelio titro aukštos kokybės virusinių preparatų, kurie būtini tiek pagrindiniams tyrimams, tiek gydymui, gamybą. Ląstelių linija pasižymi dideliu replikacijos pajėgumu ir lengvu tvarkymu, todėl tyrėjai gali atlikti tyrimus ir kurti adenovirusines konstrukcijas precedento neturinčiu tikslumu ir veiksmingumu.

Apibendrinant galima teigti, kad HEK293A ląstelių linija yra nepakeičiamas šaltinis virusologijos ir genų terapijos srityje. Jos gebėjimas stabiliai ekspresuoti E1 baltymus ir palaikyti adenovirusinę replikaciją daro ją vertinga priemone mokslininkams, norintiems gaminti adenovirusinius vektorius ir jais manipuliuoti. Ląstelių linijos savybės leidžia efektyviai kurti virusinius vektorius, kurie yra labai svarbūs mokslinių tyrimų pažangai ir galimoms terapinėms intervencijoms.

Audinys
Embrioninis inkstas
Sinonimai
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
HEK293A (Cytion katalogo numeris 305070)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
Vaisius