Pereiti prie turinio
HEK293FT
Audinys
Vaisiaus inkstai
Sinonimai
HEK293-FT, HEK-293FT, HEK 293FT, HEK-293-FT, HEK293FT, 293-FT, FT-293

Dokumentai

HEK293FT

Cell line · Prekės numeris 305275

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HEK293FT ląstelių linija yra HEK293 ląstelių linijos, iš pradžių gautos iš žmogaus embrioninių inkstų ląstelių, darinys. "FT" žyma rodo, kad šios ląstelės buvo transfekuotos SV40 didelio T-antigeno genu, kuris padidina jų gebėjimą replikuoti plazmidinius vektorius, turinčius SV40 replikacijos pradžią. Dėl šios modifikacijos 293FT ląstelės ypač naudingos didelio efektyvumo virusinių vektorių, tokių kaip lentivirozės ir adenovirusai, gamybai ir transfekcijos tyrimams molekulinės biologijos ir genų terapijos srityje.

HEK293FT ląstelės pasižymi epitelio morfologija ir sparčiai auga kultūroje, todėl yra tvirta ir patikima sistema didelio titrų skaičiaus virusų atsargoms gaminti. Jos išlaiko daugelį tėvinių HEK293 ląstelių savybių, įskaitant didelį transfekcijos efektyvumą ir gebėjimą palaikyti rekombinantinių virusų replikaciją. Mokslininkai naudoja 293FT ląsteles virusiniams vektoriams, skirtiems genų perdavimui, gaminti, genų funkcijai ir reguliavimui tirti bei įvairių ligų genų terapijai kurti. Dėl jų vaidmens gaminant virusų vektorius 293FT ląstelės yra kertinis akmuo genų terapijos, funkcinės genomikos ir molekulinio klonavimo srityse, palengvinantis mokslinių tyrimų ir terapijos plėtrą.

Audinys
Vaisiaus inkstai
Sinonimai
  • HEK293-FT
  • HEK-293FT
  • HEK 293FT
  • HEK-293-FT
  • HEK293FT
  • 293-FT
  • FT-293

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This HEK293-derived cell line (293-FT) contains an SV40 expression plasmid with neomycin selection, supporting enhanced proliferation and transfection efficiency. The construct provides stable SV40. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
HEK293FT (Cytion katalogo numeris 305275)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_6911

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
SV40 didysis T antigenas, Adenoviruso ankstyvoji 1A sritis (E1A)
Virusai
Transformantas: Adenovirusas 5, Simiano virusas 40 (SV40)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS.
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2–5 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Vaisius

10Produkto aprašymas

Sudėties lentelė