Přejít na obsah
HEK293FT
Tkáň
Fetální ledvina
Synonyma
HEK293-FT, HEK-293FT, HEK 293FT, HEK-293-FT, HEK293FT, 293-FT, FT-293

Dokumenty

HEK293FT

Cell line · Číslo výrobku 305275

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie HEK293FT je derivátem buněčné linie HEK293, původně odvozené z buněk lidských embryonálních ledvin. Označení "FT" znamená, že tyto buňky byly transfekovány genem pro velký T-antigen SV40, což zvyšuje jejich schopnost replikovat plazmidové vektory obsahující replikační původ SV40. Díky této modifikaci jsou buňky 293FT zvláště užitečné pro vysoce účinnou produkci virových vektorů, jako jsou lentiviry a adenoviry, a pro transfekční studie v molekulární biologii a výzkumu genové terapie.

Buňky HEK293FT vykazují epiteliální morfologii a rychle rostou v kultuře, čímž poskytují robustní a spolehlivý systém pro produkci virových zásob ve vysokém titru. Zachovávají si mnoho vlastností rodičovských buněk HEK293, včetně vysoké účinnosti transfekce a schopnosti podporovat replikaci rekombinantních virů. Výzkumníci využívají buňky 293FT k výrobě virových vektorů pro přenos genů, ke studiu funkce a regulace genů a k vývoji genových terapií různých onemocnění. Díky své roli při výrobě virových vektorů jsou buňky 293FT základním kamenem v oblasti genové terapie, funkční genomiky a molekulárního klonování, což usnadňuje pokrok ve výzkumu a vývoji léčebných postupů.

Tkáň
Fetální ledvina
Synonyma
  • HEK293-FT
  • HEK-293FT
  • HEK 293FT
  • HEK-293-FT
  • HEK293FT
  • 293-FT
  • FT-293

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This HEK293-derived cell line (293-FT) contains an SV40 expression plasmid with neomycin selection, supporting enhanced proliferation and transfection efficiency. The construct provides stable SV40. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
HEK293FT (katalogové číslo Cytion 305275)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6911

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Velký T antigen SV40, raná oblast 1A (E1A) adenoviru
Viry
Transformant: Adenovirus 5, Simian virus 40 (SV40)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 10% FBS.
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 až 5 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Plod

10Podrobnosti o produktu

Tabulka složení