Μετάβαση στο περιεχόμενο
HEK293FT
Ιστός
Εμβρυϊκός νεφρός
Συνώνυμα
HEK293-FT, HEK-293FT, HEK 293FT, HEK-293-FT, HEK293FT, 293-FT, FT-293

Έγγραφα

HEK293FT

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305275

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά HEK293FT είναι παράγωγο της κυτταρικής σειράς HEK293, που προέρχεται αρχικά από ανθρώπινα εμβρυϊκά νεφρικά κύτταρα. Η ονομασία "FT" υποδηλώνει ότι τα κύτταρα αυτά έχουν διαμολυνθεί με το γονίδιο του μεγάλου Τ-αντιγόνου SV40, το οποίο ενισχύει την ικανότητά τους να αναπαράγουν πλασμιδιακούς φορείς που περιέχουν την προέλευση αντιγραφής SV40. Η τροποποίηση αυτή καθιστά τα κύτταρα 293FT ιδιαίτερα χρήσιμα για την παραγωγή ιικών φορέων υψηλής απόδοσης, όπως οι lentiviruses και οι αδενοϊοί, και για μελέτες διαμόλυνσης στη μοριακή βιολογία και την έρευνα γονιδιακής θεραπείας.

Τα κύτταρα HEK293FT παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία και αναπτύσσονται γρήγορα στην καλλιέργεια, παρέχοντας ένα στιβαρό και αξιόπιστο σύστημα για την παραγωγή ιικών αποθεμάτων υψηλού τίτλου. Διατηρούν πολλά από τα χαρακτηριστικά των γονικών κυττάρων HEK293, συμπεριλαμβανομένης της υψηλής αποτελεσματικότητας της διαμόλυνσης και της ικανότητας να υποστηρίζουν την αναπαραγωγή ανασυνδυασμένων ιών. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν τα κύτταρα 293FT για την παραγωγή ιικών φορέων για την παράδοση γονιδίων, για τη μελέτη της λειτουργίας και της ρύθμισης των γονιδίων και για την ανάπτυξη γονιδιακών θεραπειών για διάφορες ασθένειες. Ο ρόλος τους στην παραγωγή ιικών φορέων καθιστά τα κύτταρα 293FT ακρογωνιαίο λίθο στους τομείς της γονιδιακής θεραπείας, της λειτουργικής γονιδιωματικής και της μοριακής κλωνοποίησης, διευκολύνοντας την πρόοδο της έρευνας και της θεραπευτικής ανάπτυξης.

Ιστός
Εμβρυϊκός νεφρός
Συνώνυμα
  • HEK293-FT
  • HEK-293FT
  • HEK 293FT
  • HEK-293-FT
  • HEK293FT
  • 293-FT
  • FT-293

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This HEK293-derived cell line (293-FT) contains an SV40 expression plasmid with neomycin selection, supporting enhanced proliferation and transfection efficiency. The construct provides stable SV40. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HEK293FT (αριθμός καταλόγου Cytion 305275)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_6911

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
SV40 large T antigen, Adenovirus early region 1A (E1A)
Ιοί
Μετασχηματιστής: 40 (SV40)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS.
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
2 έως 5 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Έμβρυο

10Λεπτομέρειες προϊόντος

Πίνακας σύνθεσης