.jpg)
- Audinys
- Inkstai
- Sinonimai
- Hek293T, HEK-293T, HEK 293T, HEK-293-T, HEK 293 T, 293-T, 293 T, 293T, Human Embryonic Kidney 293T, 293tsA1609neo
Dokumentai
HEK293T ląstelės
Cell line · Prekės numeris 300189
HEK 293T – labai lengvai transfekuojamas pirminių HEK 293 ląstelių darinys – išsiskiria kaip universalus ir galingas įrankis biotechnologijų srityje, skirtas...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- HEK293T ląstelėsCell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
HEK 293T, labai lengvai transfekcinė HEK 293 ląstelė, yra universali ir galinga priemonė biotechnologijų srityje, skirta rekombinantiniams baltymams ir įvairių tipų vakcinoms gaminti.
HEK-293T ląstelės buvo sukurtos transfektuojant embrionines inkstų 293 ląsteles plazmide, koduojančia SV40 didelį T antigeną. Originali HEK293 ląstelių linija buvo sukurta iš žmogaus embrioninių inkstų epitelio ląstelių, o jos transformacija įvyko per 293-iąjį mokslininkų atliktą eksperimentą.
Vakcinų kūrimo srityje 293T embrioninių inkstų ląstelės yra labai svarbios virusinių vektorių, įskaitant adenovirusinius vektorius, gamybai. HEK293T ląstelės tam tikromis kultūros sąlygomis transfekuojamos vektoriais su adenovirusiniais ir retrovirusiniais elementais, įskaitant SV40 replikacijos pradžią, ir taip gaminamos į virusus panašios dalelės (VLP).
VLP, neturinčios viruso genetinės medžiagos, yra labai svarbios kuriant subvienetines ir VLP pagrindu sukurtas vakcinas. Rekombinantinių baltymų gamybą 293T ląstelėse palengvina įvairūs transfekcijos metodai, daugiausia dėmesio skiriant AP sintezės baltymų ir kitų tipų baltymų, sudarančių vakcinų antigeninį komponentą, gamybai.
293T ląstelių linijos genomo inžinerijos galimybės leidžia pritaikyti raiškos konstruktus, taip dar labiau padidinant virusinių vektorių gamybą. Dėl to, kartu su galimybe gaminti baltymus suspensijos kultūroje arba adherentinėmis sąlygomis, 293T ląstelių linija yra visapusiškas sprendimas šiuolaikinių vakcinų kūrimui.
- Audinys
- Inkstai
- Paraiškos
- Vakcinų kūrimas
- Sinonimai
- Hek293T
- HEK-293T
- HEK 293T
- HEK-293-T
- HEK 293 T
- 293-T
- 293 T
- 293T
- Human Embryonic Kidney 293T
- 293tsA1609neo
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- GMO-S1
- Išsami informacija apie GMO statusą
- GMO-S1: This HEK293T cell line contains SV40, supporting high-level expression of transfected plasmids and efficient viral packaging. The construct is integrated into human embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Tumorogeninis
- Su nuogomis pelėmis
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- 30 valandų
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- HEK293T (Cytion katalogo numeris 300189)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063
05Išraiška ir jautrumas
- Išreikšti receptoriai
- Vitronektinas
- Baltojų baltymų ekspresija
- CEA neigiamas, p53 teigiamas
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 1 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 4 dienas sudarys konfluentinį sluoksnį.
- Skysčių atnaujinimas
- 2 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- Vaisius
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip






