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- Tissue
- 肾脏
- Synonyms
- Hek293T, HEK-293T, HEK 293T, HEK-293-T, HEK 293 T, 293-T, 293 T, 293T, Human Embryonic Kidney 293T, 293tsA1609neo
Documents
HEK293T 细胞
Cell line · Product number 300189
HEK 293T, a highly transfectable derivative of the parental HEK 293 cell, stands out as a versatile and powerful tool in the field of biotechnology for th...
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01General information
- Description
HEK 293T 是亲代 HEK 293 细胞的一种高度可转染的衍生物，是生物技术领域生产重组蛋白和各种疫苗的多功能强大工具。
HEK-293T 细胞是用编码 SV40 大 T 抗原的质粒转染胚胎肾脏 293 细胞产生的。最初的 HEK293 细胞系是由人类胚胎肾组织的上皮细胞发展而来的，其转化发生在研究人员进行的第 293 次实验中。
在疫苗研发领域，293T 胚胎肾细胞是生产病毒载体（包括腺病毒载体）的关键。在特定的培养条件下，HEK293T 细胞会被携带腺病毒和逆转录病毒元件（包括 SV40 复制源）的载体转染，从而产生病毒样颗粒（VLPs）。
VLPs 没有病毒遗传物质，是亚单位疫苗和基于 VLP 的疫苗的关键基础。各种转染方法促进了 293T 细胞重组蛋白的生产，重点是产生 AP 融合蛋白和其他构成疫苗抗原成分的蛋白类型。
293T 细胞系的基因组工程能力允许定制表达构建体，进一步促进了病毒载体的生产。再加上在悬浮培养或粘附条件下生产蛋白质的能力，使 293T 细胞系成为现代疫苗开发的全套解决方案。
- Tissue
- 肾脏
- Applications
- 疫苗开发
- Synonyms
- Hek293T
- HEK-293T
- HEK 293T
- HEK-293-T
- HEK 293 T
- 293-T
- 293 T
- 293T
- Human Embryonic Kidney 293T
- 293tsA1609neo
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HEK293T cell line contains SV40, supporting high-level expression of transfected plasmids and efficient viral packaging. The construct is integrated into human embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Tumourigenic
- 裸鼠
- Doubling time
- 30 小时
04Identifiers
- Citation
- HEK293T（Cytion 目录号 300189）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Vitronectin
- Protein expression
- CEA 阴性，p53 阳性
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），w：2 mM L-谷氨酰胺，w：2.2 g/L NaHCO3，w：EBSS（Cytion 文章编号 820100a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合细胞层
- Fluid renewal
- 每周 2 次
- Post-thaw recovery
- 解冻后，将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 胎儿
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
