الانتقال إلى المحتوى
خلايا HEK293T
الأنسجة
الكلى
المرادفات
Hek293T, HEK-293T, HEK 293T, HEK-293-T, HEK 293 T, 293-T, 293 T, 293T, Human Embryonic Kidney 293T, 293tsA1609neo

المستندات

خلايا HEK293T

Cell line · رقم المنتج 300189

تُعد خلايا HEK 293T، وهي مشتق من الخلية الأم HEK 293 يتميز بقدرة عالية على الاستجابة لعملية التحويل الجيني، أداةً متعددة الاستخدامات وفعالة في مجال التكنولوجيا الحيوية من أجل...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تبرز خلية HEK 293T، وهي مشتق قابل للعدوى بشكل كبير من خلية HEK 293 الأبوية، كأداة متعددة الاستخدامات وقوية في مجال التكنولوجيا الحيوية لإنتاج البروتينات المؤتلفة وأنواع مختلفة من اللقاحات.

تم توليد خلايا HEK-293T عن طريق نقل خلايا الكلى الجنينية 293 عن طريق ترميز البلازميد المشفر لمستضد SV40 الكبير T. تم تطوير سلالة خلايا HEK293 الأصلية من الخلايا الظهارية لأنسجة الكلى الجنينية البشرية، حيث تم تحويلها في التجربة رقم 293 التي أجراها الباحثون.

في مجال تطوير اللقاحات، تُعد خلايا الكلى الجنينية 293T خلايا محورية لإنتاج النواقل الفيروسية، بما في ذلك نواقل الفيروسات الغدية. تُنقل خلايا HEK293T، في ظل ظروف زراعة محددة، بنواقل تحمل عناصر فيروسية غدية وفيروسية قهقرية، بما في ذلك أصل التكاثر SV40، مما يؤدي إلى إنتاج جسيمات شبيهة بالفيروسات (VLPs).

وتُعدّ الجسيمات الشبيهة بالفيروسات، الخالية من المادة الوراثية الفيروسية، أساسية في تشكيل أساس اللقاحات القائمة على الوحدات الفرعية واللقاحات القائمة على الجسيمات الشبيهة بالفيروسات. يتم تيسير إنتاج البروتين المؤتلف في خلايا 293T من خلال طرق نقل مختلفة، مع التركيز على توليد بروتينات الاندماج AP وأنواع البروتينات الأخرى التي تشكل المكون المستضدي للقاحات.

وتسمح قدرات هندسة الجينوم في خط الخلايا 293T بتخصيص بنيات التعبير، مما يعزز إنتاج النواقل الفيروسية. وهذا، إلى جانب القدرة على إنتاج البروتينات في ظروف الزرع المعلق أو ظروف الالتصاق، يجعل من خط الخلية 293T حلاً متكاملاً لتطوير اللقاحات الحديثة.

الأنسجة
الكلى
التطبيقات
تطوير اللقاح
المرادفات
  • Hek293T
  • HEK-293T
  • HEK 293T
  • HEK-293-T
  • HEK 293 T
  • 293-T
  • 293 T
  • 293T
  • Human Embryonic Kidney 293T
  • 293tsA1609neo

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This HEK293T cell line contains SV40, supporting high-level expression of transfected plasmids and efficient viral packaging. The construct is integrated into human embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
في الفئران العارية
زمن المضاعفة
30 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HEK293T (كتالوج سيتيون رقم 300189)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0063

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
فيترونكتين
التعبير البروتيني
CEA سلبي، p53 إيجابي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستنتج طبقة متقاربة في حوالي 4 أيام
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
الجنين