.jpg)
- Тканина
- Нирка
- Синоніми
- Hek293T, HEK-293T, HEK 293T, HEK-293-T, HEK 293 T, 293-T, 293 T, 293T, Human Embryonic Kidney 293T, 293tsA1609neo
Документи
Клітини HEK293T
Cell line · Номер товару 300189
HEK 293T — похідна батьківської клітини HEK 293, що характеризується високою трансфекційною здатністю, — є універсальним і потужним інструментом у галузі біотехнології для...
Налаштування / Рекомендації
- Клітини HEK293TCell line€430.00
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
01Загальна інформація
- Опис
HEK 293T, високотрансфекційна похідна батьківської клітини HEK 293, виділяється як універсальний і потужний інструмент в галузі біотехнології для виробництва рекомбінантних білків і різних типів вакцин.
Клітини HEK-293T були отримані шляхом трансфекції ембріональних клітин нирки 293 плазмідою, що кодує великий Т-антиген SV40. Оригінальна клітинна лінія HEK293 була розроблена з епітеліальних клітин ембріональної тканини нирки людини, а її трансформація відбувалася в 293-му експерименті, проведеному дослідниками.
У сфері розробки вакцин клітини ембріональної нирки 293T є ключовими для виробництва вірусних векторів, включаючи аденовірусні вектори. Клітини HEK293T за певних умов культивування трансфікують векторами, що містять аденовірусні та ретровірусні елементи, в тому числі реплікацію SV40, що призводить до утворення вірусоподібних частинок (VLPs).
VLP, позбавлені вірусного генетичного матеріалу, є ключовими у формуванні основи субодиничних вакцин та вакцин на основі VLP. Виробництву рекомбінантних білків у клітинах лінії 293T сприяють різні методи трансфекції, з акцентом на генерування білків злиття AP та інших типів білків, які формують антигенний компонент вакцин.
Можливості геномної інженерії клітин лінії 293T дозволяють кастомізувати експресійні конструкції, що сприяє подальшому збільшенню виробництва вірусних векторів. У поєднанні зі здатністю продукувати білки в суспензійній культурі або в адгезивних умовах, це робить клітинну лінію 293T повноцінним рішенням для розробки сучасних вакцин.
- Тканина
- Нирка
- Застосування
- Розробка вакцин
- Синоніми
- Hek293T
- HEK-293T
- HEK 293T
- HEK-293-T
- HEK 293 T
- 293-T
- 293 T
- 293T
- Human Embryonic Kidney 293T
- 293tsA1609neo
02Класифікація
- Організм
- Людина
- Секс
- Жінка
- Характеристики росту
- Прихильник
- Статус ГМО
- GMO-S1
- Детальна інформація щодо статусу ГМО
- GMO-S1: This HEK293T cell line contains SV40, supporting high-level expression of transfected plasmids and efficient viral packaging. The construct is integrated into human embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
- Рівень біобезпеки
- 1
03Характеристики
- Морфологія
- Епітеліальноподібні
- Пухлиноутворювальний
- У голих мишей
- Час подвоєння
- 30 годин
04Ідентифікатори
- Посилання
- HEK293T (номер за каталогом Cytion 300189)
- Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
- 9606
- Целозавр
- CVCL_0063
05Експресія та сприйнятливість
- Рецептори, що експресуються
- Вітронектин
- Експресія білків
- CEA негативний, p53 позитивний
06Обробка та вирощування
- Живильне середовище
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
- Атмосфера інкубації
37°C, 5% CO2, волога атмосфера.
- Добавки
- Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
- Реагент для дисоціації
- Аккутаза
- Пересадка в нове середовище
- Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
- Щільність висіву
- 1 x 104 клітин/см2 дасть злитий шар приблизно за 4 дні
- Оновлення рідини
- 2 рази на тиждень
- Відновлення після відлиги
- Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
- Розморожування та культивування
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контроль якості та кріоконсервація
- Стерильність
Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.
Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.
- Середовище для заморожування
- Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
- Умови зберігання
Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.
- Умови доставки
Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.
08Донор
- Вік донора
- Плід
09Правові питання та безпека
- Заходи безпеки
- Плануючи зберігати кріовіал у рідкому азоті для подальшого розморожування, обов'язково слід дотримуватися суворих заходів безпеки. Під час перенесення заморожених зразків до резервуара з рідким азотом або з нього необхідно використовувати захисні рукавички та одяг, а також маску або захисні окуляри. Це необхідно для того, щоб зменшити ризик травмування від потенційних кріогенних вибухів при вилученні, які можуть призвести до розльоту гострих осколків.
- Гарантія
У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту
Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>
- Необхідна угода про передачу матеріалів
- Так






