.jpg)
- Tisu
- Ginjal
- Sinonim
- Hek293T, HEK-293T, HEK 293T, HEK-293-T, HEK 293 T, 293-T, 293 T, 293T, Human Embryonic Kidney 293T, 293tsA1609neo
Dokumen
Sel HEK293T
Cell line · Nomor produk 300189
HEK 293T, suatu turunan sel HEK 293 induk yang sangat mudah ditransfeksi, menonjol sebagai alat yang serbaguna dan ampuh di bidang bioteknologi untuk...
Penyesuaian / Rekomendasi
- Sel HEK293TCell line€430.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
HEK 293T, turunan yang sangat mudah ditransfeksi dari sel induk HEK 293, menonjol sebagai alat serbaguna dan ampuh di bidang bioteknologi untuk produksi protein rekombinan dan berbagai jenis vaksin.
Sel HEK-293T dihasilkan dengan mentransfeksi sel ginjal 293 embrionik dengan plasmid yang mengkode antigen T besar SV40. Garis sel HEK293 yang asli dikembangkan dari sel epitel jaringan ginjal embrionik manusia, dengan transformasinya terjadi pada percobaan ke-293 yang dilakukan oleh para peneliti.
Dalam bidang pengembangan vaksin, sel ginjal embrionik 293T sangat penting untuk produksi vektor virus, termasuk vektor adenovirus. Sel HEK293T, dalam kondisi kultur tertentu, ditransfeksi dengan vektor yang membawa elemen adenoviral dan retroviral, termasuk asal replikasi SV40, yang mengarah pada produksi partikel mirip virus (VLP).
VLP, yang tidak memiliki materi genetik virus, adalah kunci dalam membentuk dasar vaksin berbasis subunit dan VLP. Produksi protein rekombinan dalam sel 293T difasilitasi oleh berbagai metode transfeksi, dengan penekanan pada pembuatan protein fusi AP dan jenis protein lain yang membentuk komponen antigenik vaksin.
Kemampuan rekayasa genom lini sel 293T memungkinkan penyesuaian konstruksi ekspresi, yang selanjutnya meningkatkan produksi vektor virus. Hal ini, ditambah dengan kemampuan untuk memproduksi protein dalam kultur suspensi atau kondisi yang melekat, menjadikan lini sel 293T sebagai solusi lengkap untuk pengembangan vaksin modern.
- Tisu
- Ginjal
- Aplikasi
- Pengembangan vaksin
- Sinonim
- Hek293T
- HEK-293T
- HEK 293T
- HEK-293-T
- HEK 293 T
- 293-T
- 293 T
- 293T
- Human Embryonic Kidney 293T
- 293tsA1609neo
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Status GMO
- GMO-S1
- Rincian status GMO
- GMO-S1: This HEK293T cell line contains SV40, supporting high-level expression of transfected plasmids and efficient viral packaging. The construct is integrated into human embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Tumorigenik
- Pada tikus telanjang
- Waktu penggandaan
- 30 jam
04Pengidentifikasi
- Referensi
- HEK293T (Nomor katalog Cytion 300189)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063
05Ekspresi dan kerentanan
- Reseptor yang diekspresikan
- Vitronectin
- Ekspresi protein
- CEA negatif, p53 positif
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Kepadatan penanaman
- 1 x 10⁴ sel/cm² akan membentuk lapisan yang padat dalam waktu sekitar 4 hari.
- Pergantian cairan
- 2 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- Janin
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
