Células HEK293T

Las células HEK 293T, un derivado altamente transfectable de la célula parental HEK 293, destacan como una herramienta versátil y potente en el campo de la biotecnología para la producción de proteínas recombinantes y diversos tipos de vacunas.

Las células HEK-293T se generaron transfectando células embrionarias de riñón 293 con un plásmido que codifica el antígeno SV40 T grande. La línea celular HEK293 original se desarrolló a partir de las células epiteliales del tejido renal embrionario humano, y su transformación se produjo en lo que fue notablemente el experimento 293 realizado por los investigadores.

En el ámbito del desarrollo de vacunas, las células de riñón embrionario 293T son fundamentales para la producción de vectores virales, incluidos los vectores de adenovirus. Las células HEK293T, en condiciones de cultivo específicas, se transfectan con vectores portadores de elementos adenovirales y retrovirales, incluido el origen de replicación del SV40, lo que conduce a la producción de partículas similares a virus (VLP).

Las VLP, desprovistas de material genético vírico, son fundamentales para constituir la base de las vacunas basadas en subunidades y VLP. La producción de proteínas recombinantes en células 293T se facilita mediante diversos métodos de transfección, con énfasis en la generación de proteínas de fusión AP y otros tipos de proteínas que forman el componente antigénico de las vacunas.

Las capacidades de ingeniería genómica de la línea celular 293T permiten personalizar las construcciones de expresión, lo que impulsa aún más la producción de vectores virales. Esto, unido a la capacidad de producir proteínas en cultivo en suspensión o en condiciones adherentes, convierte a la línea celular 293T en una solución completa para el desarrollo de vacunas modernas.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía