HEK293T 細胞

HEK 293T 作為親本 HEK 293 細胞的一種高轉染效率衍生物，在生物技術領域中，是生產重組蛋白及各類疫苗的一種多功能且強大的工具。

HEK-293T 細胞是透過將編碼 SV40 大 T 抗原的質體轉染至胚胎腎 293 細胞而建立的。 原始的 HEK293 細胞系是從人類胚胎腎臟組織的上皮細胞中培育而來，其轉化過程發生在研究人員進行的第 293 次實驗中，這一點尤為值得注意。

在疫苗開發領域中，293T 胚胎腎細胞對於病毒載體（包括腺病毒載體）的生產至關重要。 在特定的培養條件下，HEK293T 細胞會被轉染攜帶腺病毒和逆轉錄病毒元件（包括 SV40 複製起始點）的載體，從而產生類病毒顆粒（VLPs）。

這些不含有病毒遺傳物質的類病毒顆粒，是構建亞單位疫苗及基於類病毒顆粒疫苗的關鍵基礎。透過各種轉染方法，可促進 293T 細胞中重組蛋白的生產，其中重點在於生成 AP 融合蛋白及其他構成疫苗抗原成分的蛋白質類型。

293T 細胞系的基因組工程能力，使得表達載體能夠進行客製化設計，進一步提升病毒載體的產量。加上其能在懸浮培養或貼壁培養條件下生產蛋白質的能力，使 293T 細胞系成為現代疫苗開發的全方位解決方案。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。