Cellules HEK293T

La lignée HEK 293T, un dérivé hautement transfectable de la lignée cellulaire parentale HEK 293, s’impose comme un outil polyvalent et puissant dans le domaine de la biotechnologie pour la production de protéines recombinantes et de divers types de vaccins.

Les cellules HEK-293T ont été générées par transfection de cellules rénales embryonnaires 293 avec un plasmide codant pour le grand antigène T du SV40. La lignée cellulaire HEK-293 originale a été développée à partir de cellules épithéliales de tissu rénal embryonnaire humain; sa transformation a eu lieu lors de la 293e expérience menée par les chercheurs.

Dans le domaine du développement des vaccins, les cellules rénales embryonnaires 293T jouent un rôle central dans la production de vecteurs viraux, notamment les vecteurs adénoviraux. Les cellules HEK293T, dans des conditions de culture spécifiques, sont transfectées avec des vecteurs portant des éléments adénoviraux et rétroviraux, y compris l’origine de réplication du SV40, ce qui conduit à la production de particules pseudo-virales (VLP).

Les VLP, dépourvues de matériel génétique viral, jouent un rôle clé dans la conception des vaccins à sous-unités et à base de VLP. La production de protéines recombinantes dans les cellules 293T est facilitée par diverses méthodes de transfection, notamment pour la génération de protéines de fusion AP et d’autres types de protéines constituant la composante antigénique des vaccins.

Les capacités d’ingénierie génomique de la lignée cellulaire 293T permettent la personnalisation des constructions d’expression, ce qui stimule davantage la production de vecteurs viraux. Cette caractéristique, combinée à la capacité de produire des protéines en culture en suspension ou en conditions d’adhérence, fait de la lignée cellulaire 293T une solution complète pour le développement moderne de vaccins.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.