Клетки HEK293T

HEK 293T, силно трансфектируемо производно на родителската клетка HEK 293, се откроява като универсален и мощен инструмент в областта на биотехнологиите за производство на рекомбинантни протеини и различни видове ваксини.

Клетките HEK-293T са генерирани чрез трансфектиране на ембрионални бъбречни клетки 293 с плазмид, кодиращ големия Т антиген SV40. Първоначалната клетъчна линия HEK293 е разработена от епителни клетки на човешка ембрионална бъбречна тъкан, като трансформацията ѝ се случва в 293-ия експеримент, проведен от изследователите.

В сферата на разработването на ваксини ембрионалните бъбречни клетки 293Т са ключови за производството на вирусни вектори, включително аденовирусни вектори. При специфични условия на култивиране клетките HEK293T се трансфектират с вектори, носещи аденовирусни и ретровирусни елементи, включително произхода на репликация SV40, което води до производството на вирусоподобни частици (VLP).

VLP, лишени от вирусен генетичен материал, са ключови за формирането на основата на субчастични и VLP-базирани ваксини. Производството на рекомбинантни протеини в клетки 293T се улеснява от различни методи за трансфекция, като се набляга на генерирането на AP фюжън протеини и други видове протеини, които формират антигенния компонент на ваксините.

Възможностите за геномно инженерство на клетъчната линия 293T позволяват персонализиране на експресионните конструкции, което допълнително повишава производството на вирусни вектори. Това, в съчетание с възможността за производство на протеини в суспензионна култура или в условия на адхезия, превръща клетъчната линия 293T в пълноценно решение за разработване на съвременни ваксини.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация