Премини към съдържанието
HEK293T/17
Тъкан
Ембрионален бъбрек
Синоними
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Документи

HEK293T/17

Cell line · Номер на продукта 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия 293T/17 е имортализиран вариант на линията HEK293, получена от човешки ембрионални бъбречни клетки и широко използвана в научните изследвания, особено при изследването и производството на ретровирусни и лентивирусни вектори. Тази клетъчна линия е модифицирана, за да експресира големия Т антиген на SV40, което повишава нейната полезност при производството на вирусни вектори. Експресията на големия Т антиген на SV40 е ключова характеристика, която позволява на тези клетки да репликират плазмиди, съдържащи произхода на репликация на SV40, което значително увеличава добива на плазмидна ДНК при процедури за преходна трансфекция. Тази характеристика е особено полезна за производството на вирусни вектори.

клетките 293Т/17 са от съществено значение за производството на вирусни вектори, като ретровируси и лентивируси. Те ефективно произвеждат вирусни частици благодарение на способността си да амплифицират трансфектираните плазмиди и да подпомагат сглобяването и освобождаването на вирусите. Това ги прави жизненоважен инструмент в изследванията на генната терапия, където тези вектори се използват за доставяне на генетичен материал в клетките-гостоприемници. Клетките показват висока ефективност на трансфекция, която е от решаващо значение за успешното въвеждане и експресия на чужда ДНК по време на конструирането на вектора. Тази висока ефективност дава възможност за ефективно изучаване на генната функция и генериране на рекомбинантни протеини.

Надеждните възможности на клетъчната линия 293T/17 я правят безценна както за фундаментални научни изследвания, така и за терапевтични приложения. Тя се използва широко в молекулярната биология и генното инженерство за експресия на протеини, анализ на генната функция и разработване на нови генни терапии. Ефективността на клетъчната линия при производството на вирусни вектори улеснява експериментите, изискващи доставяне на генетичен материал, което я прави крайъгълен камък в областта на вирусологията. Клетъчната линия 293T/17 продължава да играе ключова роля в напредъка на разбирането ни за функцията на гените и разработването на терапевтични интервенции.

Тъкан
Ембрионален бъбрек
Приложения
Тази клетъчна линия е оптимален избор за трансфекция, високопроизводителни скрининги, токсикология и разработване на ваксини.
Синоними
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален

04Идентификатори

Източник
HEK293T/17 (каталожен номер на Cytion 305117)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1926

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
SV40 T антиген
Вируси
SV40 (експресира SV40 T антиген)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Плод