HEK293T/17

La linea cellulare 293T/17 è una variante immortalizzata della linea HEK293, derivata da cellule renali embrionali umane e ampiamente utilizzata nella ricerca, in particolare nello studio e nella produzione di vettori retrovirali e lentivirali. Questa linea cellulare è stata modificata per esprimere l'antigene SV40 large T, migliorando la sua utilità nella produzione di vettori virali. L'espressione dell'antigene SV40 large T è una caratteristica fondamentale che consente a queste cellule di replicare plasmidi contenenti l'origine di replicazione SV40, aumentando significativamente la resa di DNA plasmidico nelle procedure di trasfezione transitoria. Questa caratteristica è particolarmente vantaggiosa per la produzione di vettori virali.

le cellule 293T/17 sono essenziali per la produzione di vettori virali come retrovirus e lentivirus. Producono efficientemente particelle virali grazie alla loro capacità di amplificare i plasmidi trasfettati e di sostenere l'assemblaggio e il rilascio virale. Ciò le rende uno strumento fondamentale nella ricerca sulla terapia genica, dove questi vettori vengono utilizzati per trasportare materiale genetico nelle cellule ospiti. Le cellule presentano un'elevata efficienza di trasfezione, fondamentale per il successo dell'introduzione e dell'espressione del DNA estraneo durante la costruzione del vettore. Questa elevata efficienza consente di studiare la funzione dei geni e di generare efficacemente proteine ricombinanti.

Le robuste capacità della linea cellulare 293T/17 la rendono preziosa sia per la ricerca scientifica di base che per le applicazioni terapeutiche. È ampiamente utilizzata in biologia molecolare e ingegneria genetica per l'espressione di proteine, l'analisi della funzione genica e lo sviluppo di nuove terapie geniche. L'efficienza della linea cellulare nella produzione di vettori virali facilita gli esperimenti che richiedono la somministrazione di materiale genetico, rendendola una pietra miliare nel campo della virologia. La linea cellulare 293T/17 continua a svolgere un ruolo fondamentale nella comprensione della funzione genica e nello sviluppo di interventi terapeutici.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia