Pāriet uz saturu
HEK293T/17
Audums
Embrionālā niere
Sinonīmi
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Dokumenti

HEK293T/17

Cell line · Preces numurs 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

293T/17 šūnu līnija ir HEK293 līnijas imortizēts variants, kas iegūts no cilvēka embrionālajām nieru šūnām un tiek plaši izmantots pētniecībā, jo īpaši retrovīrusu un lentivīrusu vektoru izpētē un ražošanā. Šī šūnu līnija ir modificēta, lai ekspresētu SV40 lielo T antigēnu, tādējādi uzlabojot tās lietderību vīrusu vektoru ražošanā. SV40 lielā T antigēna ekspresija ir galvenā īpašība, kas ļauj šīm šūnām replicēt plazmīdas, kas satur SV40 replikācijas sākumu, ievērojami palielinot plazmīdu DNS iznākumu pārejas transfekcijas procedūrās. Šī īpašība ir īpaši noderīga vīrusu vektoru ražošanā.

293T/17 šūnas ir būtiskas tādu vīrusu vektoru ražošanā kā retrovīrusi un lentivīrusi. Tās efektīvi ražo vīrusu daļiņas, pateicoties to spējai amplificēt transficētās plazmīdas un atbalstīt vīrusu montāžu un atbrīvošanos. Tas padara tos par būtisku līdzekli gēnu terapijas pētniecībā, kur šos vektorus izmanto, lai nogādātu ģenētisko materiālu saimnieka šūnās. Šīm šūnām piemīt augsta transfekcijas efektivitāte, kas ir ļoti svarīga svešas DNS sekmīgai ieviešanai un ekspresijai vektoru konstruēšanas laikā. Šī augstā efektivitāte ļauj efektīvi pētīt gēnu funkcijas un radīt rekombinantus proteīnus.

Pateicoties 293T/17 šūnu līnijas spēcīgajām spējām, tā ir nenovērtējama gan fundamentāliem zinātniskiem pētījumiem, gan terapeitiskiem lietojumiem. To plaši izmanto molekulārajā bioloģijā un gēnu inženierijā olbaltumvielu ekspresijai, gēnu funkciju analīzei un jaunu gēnu terapiju izstrādei. Šūnu līnijas efektivitāte vīrusu vektoru ražošanā atvieglo eksperimentus, kuros nepieciešama ģenētiskā materiāla piegāde, padarot to par stūrakmeni virusoloģijas jomā. 293T/17 šūnu līnijai joprojām ir izšķiroša nozīme gēnu funkciju izpratnes uzlabošanā un terapeitisko intervenču izstrādē.

Audums
Embrionālā niere
Pieteikumi
Šī šūnu līnija ir optimāla izvēle transfekcijai, augstas veiktspējas skrīningam, toksikoloģijai un vakcīnu izstrādei.
Sinonīmi
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
HEK293T/17 (Cytion kataloga numurs 305117)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
SV40 T antigēns
Vīrusi
SV40 (ekspresē SV40 T antigēnu)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Auglis