Celice HEK293T

HEK 293T, visoko transfekcijski derivat starševske celice HEK 293, je vsestransko in zmogljivo orodje na področju biotehnologije za proizvodnjo rekombinantnih beljakovin in različnih vrst cepiv.

Celice HEK 293T so nastale s transfekcijo celic embrionalne ledvice 293 s plazmidom, ki kodira antigen SV40 large T. Prvotna celična linija HEK293 je bila razvita iz epitelijskih celic tkiva človeških embrionalnih ledvic, pri čemer je do njene transformacije prišlo v 293. poskusu, ki so ga izvedli raziskovalci.

Na področju razvoja cepiv so celice embrionalnih ledvic 293T ključne za proizvodnjo virusnih vektorjev, vključno z adenovirusnimi vektorji. Celice HEK293T se pod posebnimi pogoji gojenja transficirajo z vektorji z adenovirusnimi in retrovirusnimi elementi, vključno z izvorom replikacije SV40, kar vodi v proizvodnjo virusom podobnih delcev (VLP).

VLP, ki nimajo virusnega genetskega materiala, so ključni za osnovo cepiv na osnovi podenot in VLP. Proizvodnjo rekombinantnih beljakovin v celicah 293T omogočajo različne metode transfekcije s poudarkom na proizvodnji fuzijskih beljakovin AP in drugih vrst beljakovin, ki tvorijo antigensko komponento cepiv.

Zmogljivosti genomskega inženiringa celične linije 293T omogočajo prilagajanje ekspresijskih konstruktov, kar dodatno spodbuja proizvodnjo virusnih vektorjev. Skupaj z zmožnostjo proizvajanja beljakovin v suspenzijski kulturi ali adherentnih pogojih je celična linija 293T celovita rešitev za sodoben razvoj cepiv.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo