Celice HEK293

Celična linija HEK293, imortalizirana epitelijska celična linija, ki jo je Alex van der Eb na Univerzi v Utrechtu v 70. letih prejšnjega stoletja pridobil iz celic človeških embrionalnih ledvic, je zaradi svoje izjemne vsestranskosti in enostavne genetske manipulacije postala osrednji eksperimentalni model v molekularni biologiji in biotehnoloških aplikacijah.

Transformacija celične linije HEK293 je vključevala integracijo posebnega segmenta iz DNK adenovirusa 5, ki je v celični genom vgradil adenovirusna gena E1A in E1B. Modifikacija adenovirusne DNK je omogočila sposobnost celičnih linij, da učinkovito sprejemajo tujo DNK, kar je znano kot visoka učinkovitost transfekcije. Integracija virusne DNK v genom celic HEK293 je povzročila celično nesmrtnost in znatno povečala uporabnost teh celic v biotehnoloških aplikacijah, saj je omogočila stabilno vključevanje in izražanje eksogene DNK, kar se imenuje stabilna transfekcija. Ta sposobnost omogoča trajno prisotnost in delovanje tujih genov v celicah, zaradi česar je HEK293 neprecenljivo orodje za genetske študije in biotehnologijo.

Zato so celice HEK293 postale temeljni vir v biotehnologiji za proizvodnjo rekombinantnih proteinov, vključno s pomembnimi terapevtskimi proteini, in kot robustne gostiteljske celice za proizvodnjo virusnih vektorjev, zlasti adenovirusnih in lentivirusnih vektorjev. Celice HEK 293 so ključnega pomena v farmacevtski industriji za visoko zmogljive presejalne teste, proizvodnjo genskih terapij, usmerjenih v specifične gene, povezane z motnjami posameznih genov, in študije adenovirusnih okužb.

V industrijski biotehnologiji se uporabnost človeške celične linije HEK 293 razteza na proizvodnjo rekombinantnih encimov, proizvodnjo virusnih vektorjev, kot so adenovirusni vektorji, proizvodnjo beljakovin in razvoj biosenzorjev. Toksikološke raziskave imajo koristi od uporabe celične linije HEK pri ocenjevanju vpliva kemikalij na celično biologijo, vključno z učinki na tipične ledvične celice in možnostjo genskih terapij. Sposobnost nesmrtne celične linije HEK293, da učinkovito proizvaja nativne beljakovine, poudarja njeno bistveno vlogo v medicinskih raziskavah, vključno z raziskavami raka in raziskovanjem temeljev genskega zdravljenja.

Celice HEK293 so edinstvena platforma za preučevanje celične biologije in zanimivih beljakovin, saj po vsestranskosti in uporabnosti v raziskavah in industriji prekašajo druge celične linije. Za primerjavo, celice HEK293T, ki so različica HEK293, so spremenjene za povečanje učinkovitosti transfekcije, celice HEK293F so prilagojene za suspenzijsko gojenje, da se olajša proizvodnja beljakovin v velikem obsegu, druge celične linije sesalcev, kot so celice Vero, pridobljene iz tkiva opičjih ledvic, pa se uporabljajo predvsem pri razvoju cepiv in virusnih študij.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo