Skip to content
เซลล์ HEK293
Tissue
ไต
Synonyms
Hek293, HEK-293, HEK/293, HEK 293, HEK, 293, 293, 293 HEK, 293 Ad5, Human Embryonic Kidney 293

Documents

เซลล์ HEK293

Cell line · Product number 300192

The HEK293 cell line, an immortalized epithelial cell line derived from human embryonic kidney cells in the 1970s by Alex van der Eb at the University of ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายพันธุ์เซลล์ HEK293 ซึ่งเป็นเซลล์เยื่อบุผิวที่ถูกทำให้เป็นอมตะและสกัดมาจากเซลล์ไตของตัวอ่อนมนุษย์ในช่วงทศวรรษ 1970 โดย อเล็กซ์ ฟาน เดอร์ เอ็บ ที่มหาวิทยาลัยอูเทรคท์ ได้กลายเป็นแบบจำลองการทดลองที่สำคัญในชีววิทยาระดับโมเลกุลและการประยุกต์ใช้ทางเทคโนโลยีชีวภาพ เนื่องจากความหลากหลายที่น่าทึ่งและความง่ายในการดัดแปลงพันธุกรรม

การเปลี่ยนแปลงของสายพันธุ์เซลล์ HEK293 เกิดจากการรวมตัวของส่วนเฉพาะจากดีเอ็นเอของอะดีโนไวรัส 5 โดยการฝังยีน E1A และ E1B ของอะดีโนไวรัสเข้าไปในจีโนมของเซลล์ การดัดแปลงดีเอ็นเอของอะดีโนไวรัสนี้ทำให้เซลล์สายพันธุ์มีความสามารถในการดูดซึมดีเอ็นเอจากภายนอกได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งเป็นคุณสมบัติที่เรียกว่ามีประสิทธิภาพในการทรานส์เฟคชันสูงการรวมตัวของดีเอ็นเอไวรัสเข้ากับจีโนมของเซลล์ HEK293 ส่งผลให้เกิดการคงอยู่ของเซลล์อย่างถาวรและเพิ่มประโยชน์ของเซลล์เหล่านี้ในด้านการประยุกต์ใช้ทางเทคโนโลยีชีวภาพอย่างมีนัยสำคัญ โดยช่วยให้การนำเข้าและการแสดงออกของดีเอ็นเอจากภายนอกเกิดขึ้นอย่างเสถียร กระบวนการนี้เรียกว่าการถ่ายโอนยีนอย่างเสถียร ความสามารถนี้ทำให้สามารถมีอยู่และทำงานของยีนต่างชาติภายในเซลล์ได้อย่างต่อเนื่อง ทำให้ HEK293 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาทางพันธุกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพ

ผลที่ตามมาคือ เซลล์ HEK293 ได้กลายเป็นทรัพยากรพื้นฐานในเทคโนโลยีชีวภาพสำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ รวมถึงโปรตีนบำบัดที่สำคัญ และทำหน้าที่เป็นเซลล์โฮสต์ที่แข็งแกร่งสำหรับการสร้างเวกเตอร์ไวรัส โดยเฉพาะเวกเตอร์อะดีโนไวรัสและเวกเตอร์เลนติไวรัส เซลล์ HEK 293 มีความสำคัญอย่างยิ่งในอุตสาหกรรมเภสัชกรรมสำหรับการทดสอบการคัดกรองแบบความเข้มสูง การผลิตยีนบำบัดที่มุ่งเป้าไปยังยีนเฉพาะที่เกี่ยวข้องกับโรคที่เกิดจากยีนเดี่ยว และการศึกษาการติดเชื้ออะดีโนไวรัส

ในเทคโนโลยีชีวภาพอุตสาหกรรม สายเซลล์มนุษย์ HEK293 มีประโยชน์ในการผลิตเอนไซม์รีคอมบิแนนท์ การผลิตเวกเตอร์ไวรัส เช่น เวกเตอร์อะดีโนไวรัส การผลิตโปรตีน และการพัฒนาไบโอเซนเซอร์ งานวิจัยด้านพิษวิทยายังได้รับประโยชน์จากการใช้สายเซลล์ HEK ในการประเมินผลกระทบของสารเคมีต่อชีววิทยาของเซลล์ รวมถึงผลกระทบต่อเซลล์ไตทั่วไปและศักยภาพในการบำบัดด้วยยีนความสามารถของเซลล์ไลน์อมตะ HEK293 ในการผลิตโปรตีนตามธรรมชาติได้อย่างมีประสิทธิภาพ สะท้อนให้เห็นถึงบทบาทสำคัญในการวิจัยทางการแพทย์ รวมถึงการวิจัยมะเร็งและการสำรวจพื้นฐานของการบำบัดด้วยยีน

เซลล์ HEK293 เป็นแพลตฟอร์มที่มีเอกลักษณ์เฉพาะสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเซลล์และโปรตีนที่น่าสนใจ โดยมีความหลากหลายและประโยชน์ใช้สอยที่เหนือกว่าสายพันธุ์เซลล์อื่น ๆ ทั้งในงานวิจัยและการประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรมเมื่อเปรียบเทียบกันแล้ว เซลล์ HEK293T ซึ่งเป็นสายพันธุ์หนึ่งของ HEK293 ได้รับการดัดแปลงเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการถ่ายโอนยีน เซลล์ HEK293F ได้รับการปรับให้เหมาะสมกับการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอยเพื่ออำนวยความสะดวกในการผลิตโปรตีนในปริมาณมาก และเซลล์สายพันธุ์อื่น ๆ ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เช่น เซลล์ Vero ซึ่งสกัดจากเนื้อเยื่อไตของลิง ถูกนำมาใช้เป็นหลักในการพัฒนาวัคซีนและการศึกษาไวรัส

Tissue
ไต
Applications
โฮสต์สำหรับการถ่ายโอนยีน
Synonyms
  • Hek293
  • HEK-293
  • HEK/293
  • HEK 293
  • HEK
  • 293
  • 293
  • 293 HEK
  • 293 Ad5
  • Human Embryonic Kidney 293

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293 embryonic kidney-derived cell line contains adenovirus-5 E1A/E1B sequences due to transformation but does not release infectious virus, enabling high proliferative capacity. The modification is stably present in embryonal kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ในหนูที่ไม่มีขน
Ploidy status
30% ของเซลล์ HEK293 มีโครโมโซมแบบไตรโซมีต่ำโดยมีโครโมโซมแบบโมดัล 64 ตัว พบเซลล์ที่มีจำนวนโครโมโซมมากกว่าปกติใน 4.2% ของเซลล์
Doubling time
30 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HEK293 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300192)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
วิตโรเนคติน
Protein expression
CEA เป็นลบ, p53 เป็นบวก
Virus susceptibility
เปลี่ยนแปลงด้วยดีเอ็นเออะดีโนไวรัส 5 ดีเอ็นเออะดีโนไวรัส 5

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 104 เซลล์/cm2 จะให้ชั้นเซลล์ที่หนาแน่นสมบูรณ์ภายในประมาณ 4 วัน
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ทารกในครรภ์