Skip to content
HEK293-FAP
Tissue
ไตของทารกในครรภ์
Disease
เปลี่ยนแปลง/เป็นอมตะ; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก (มีพื้นฐานจาก HEK293)

Documents

HEK293-FAP

Cell line · Product number 305419

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

€1,900.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

ข้อจำกัดความรับผิดชอบ: ราคาที่แสดงสำหรับเซลล์ไลน์เป็นราคาสำหรับลูกค้าในสถาบันการศึกษา/ไม่แสวงหากำไรเท่านั้น สำหรับหน่วยงานเชิงพาณิชย์ ราคาประมาณ €6,250
หากท่านเป็นตัวแทนของหน่วยงานเชิงพาณิชย์หรือไม่แน่ใจว่าอยู่ในหมวดหมู่ใด กรุณา ติดต่อเรา


สายเซลล์ HEK293-FAP เป็นสายเซลล์ HEK293 ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรมให้คงที่และสามารถแสดงออกโปรตีน Fibroblast Activation Protein (FAP) ในระดับสูง ประมาณ 123,000 โมเลกุลต่อเซลล์ สายเซลล์นี้ถูกพัฒนาโดยใช้เทคโนโลยี landing pad ของ inscreenex ซึ่งรับประกันการผสานยีน FAP เข้ากับตำแหน่งจีโนมที่กำหนดไว้ล่วงหน้าและผ่านการตรวจสอบความถูกต้องแล้วได้อย่างแม่นยำและสามารถทำซ้ำได้ FAP หรือที่รู้จักในชื่อ Seprase หรือ DPPIV เป็นเซรีนโปรตีเอสที่มีบทบาทในการปรับโครงสร้างของเมทริกซ์นอกเซลล์ ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งในกระบวนการเช่น การหายของแผล การซ่อมแซมเนื้อเยื่อ และการเกิดพังผืด นอกจากนี้ FAP ยังมีการเพิ่มขึ้นอย่างมากในสโตรมาของมะเร็งเยื่อบุผิวหลายชนิด ทำให้เป็นเป้าหมายที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยด้านมะเร็งวิทยาและเป็นไบโอมาร์คเกอร์ที่มีศักยภาพสำหรับไฟโบรบลาสต์ที่เกี่ยวข้องกับมะเร็ง

การแสดงออกของ FAP ในสายเซลล์นี้ได้รับการยืนยันโดยใช้การวิเคราะห์ด้วยโฟลไซโตเมทรีร่วมกับแอนติบอดีที่จำเพาะต่อเป้าหมาย ซึ่งช่วยให้มั่นใจในความสม่ำเสมอและความน่าเชื่อถือของความหนาแน่นของตัวรับทั่วทั้งประชากรเซลล์

Tissue
ไตของทารกในครรภ์
Disease
เปลี่ยนแปลง/เป็นอมตะ; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก (มีพื้นฐานจาก HEK293)
Applications
การพัฒนาแอนติบอดีและภูมิคุ้มกันบำบัดที่มุ่งเป้า FAP; ชีววิทยาของเนื้อเยื่อรอบเนื้องอก; การวิจัยไฟโบรบลาสต์ที่เกี่ยวข้องกับมะเร็ง (CAF); วิศวกรรมแอนติบอดี ADC และแอนติบอดีสองเป้า; การคัดกรองมะเร็งวิทยา

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293 derivative contains a fibroblast activation protein (FAP) expression construct for receptor-function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
Doubling time
ประมาณ 24-36 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HEK293-FAP (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305419)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6G23

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
FAP (เซปราเซ หรือ ดีพีพีไอวี)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, โซเดียมไพรูเวต 1 มิลลิโมลาร์, HEPES 10 มิลลิโมลาร์, NEAA 1% ปริมาตรรวม 100% ให้เติม Geneticin (G418-Sulfat) จนได้ความเข้มข้นสุดท้าย 1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร
Dissociation reagent
ทริปซิน-เอดทีเอ
Subculturing
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เกาะติดแบบปกติ: ดูดสกัดน้ำเลี้ยงเก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติด และล้างเซลล์ด้วย PBS เพื่อกำจัดน้ำเลี้ยงที่เหลืออยู่หลังจากดูด PBS ออกแล้ว ให้เติมสารละลาย Trypsin/EDTA ในปริมาณที่เหมาะสมตามขนาดของภาชนะเพาะเลี้ยง (เช่น 1 มล. สำหรับขวด T25, 3 มล. สำหรับขวด T75) และทำการบ่มที่อุณหภูมิห้องหรือ 37°C จนเซลล์หลุดออกจากผนัง (ประมาณ 5-10 นาที)สังเกตการหลุดของเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ และเคาะภาชนะเบา ๆ หากจำเป็นเพื่อปล่อยเซลล์ เมื่อเซลล์หลุดออกแล้ว ให้เติมอาหารเลี้ยงเซลล์แบบครบถ้วนเพื่อหยุดการทำงานของ Trypsin/EDTA คนเซลล์ให้กระจายตัวอย่างเบามือ แล้วแบ่งตัวอย่างเซลล์ที่แขวนลอยใส่ลงในภาชนะเพาะเลี้ยงใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด วางภาชนะในตู้อบที่ตั้งอุณหภูมิไว้ที่ 37°Cพร้อมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% และเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ทุก 2-3 วัน
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery

หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้แบ่งเซลล์ในอัตราส่วน 1:2 ถึง 1:3 ลงในขวด T25 และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะอย่างน้อย 24 ชั่วโมง

สำหรับการยึดเกาะและการมีชีวิตรอดที่ดีที่สุดหลังการละลายเซลล์ เราแนะนำให้ใช้ขวดหรือจานเคลือบคอลลาเจนสำหรับการเพาะเลี้ยงเริ่มต้นหลังการฟื้นฟูจากภาวะแช่แข็ง การเคลือบคอลลาเจนไม่จำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงตามปกติในครั้งถัดไป

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ทารกในครรภ์