Skip to content
เซลล์ HEK293-F
Tissue
ไต
Synonyms
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Documents

เซลล์ HEK293-F

Cell line · Product number 300260

HEK293-F cells are a fast-growing, highly transfectable subline derived from the human embryonic kidney 293 (HEK293) cell line. The 'F' designation indica...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ HEK293-F เป็นสายพันธุ์ย่อยที่เติบโตเร็วและสามารถถ่ายโอนยีนได้สูง ซึ่งพัฒนามาจากเซลล์ไลน์มนุษย์เอมบริโอนิกไครีนี 293 (HEK293) โดยตัว 'F' หมายถึงเซลล์เหล่านี้ได้รับการปรับให้เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโตในสภาพแขวนลอย ทำให้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการผลิตโปรตีนในปริมาณมาก เซลล์สามารถเจริญเติบโตในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ปราศจากเซรั่มหลากหลายชนิด ซึ่งเอื้อต่อกระบวนการผลิตที่สามารถขยายขนาดได้ เหมาะสำหรับการประยุกต์ใช้ในด้านเทคโนโลยีชีวภาพและเภสัชกรรมเซลล์ HEK293-F ยังคงมีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเยื่อบุผิวเช่นเดียวกับสายพันธุ์ HEK293 ต้นกำเนิด และสามารถเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอยได้โดยไม่จำเป็นต้องยึดเกาะกับพื้นผิวแข็ง

เซลล์เหล่านี้มีประสิทธิภาพสูงในการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ และถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการผลิตเวกเตอร์ไวรัสสำหรับการบำบัดทางพันธุกรรม รวมถึงเวกเตอร์อะดีโนไวรัส เวนทิริไวรัส และเรโทรไวรัส การเจริญเติบโตที่แข็งแรงในสภาพแขวนลอยและความง่ายในการทรานส์เฟคทำให้เซลล์เหล่านี้เหมาะสำหรับการใช้งานในโปรโตคอลการทรานส์เฟคชั่วคราว ซึ่งสามารถผลิตโปรตีนได้ในปริมาณสูงภายในไม่กี่วันหลังการทรานส์เฟค คุณลักษณะนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับวงจรการผลิตที่รวดเร็วในสภาพแวดล้อมการวิจัยและอุตสาหกรรมความสามารถในการปรับตัวของเซลล์ HEK293-F ต่อสภาพแวดล้อมการเจริญเติบโตที่หลากหลายและความสามารถในการเพาะเลี้ยงความหนาแน่นสูง ช่วยเพิ่มประโยชน์ใช้สอยในกระบวนการชีวภาพ

Tissue
ไต
Applications
โฮสต์สำหรับการถ่ายโอนยีน
Synonyms
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ในหนูที่ไม่มีขน
Doubling time
30 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HEK293-F (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300260)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
วิตโรเนคติน
Protein expression
CEA เป็นลบ, p53 เป็นบวก
Viruses
เปลี่ยนแปลงด้วยดีเอ็นเออะดีโนไวรัส 5 ดีเอ็นเออะดีโนไวรัส 5

06Handling and culture

Culture medium
ซีดี293 (เธอร์โม)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม. จะให้ชั้นเซลล์ที่หนาแน่นสมบูรณ์ในเวลาประมาณ 4 วัน
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ทารกในครรภ์