Ga naar de inhoud
HEK293-F-cellen
Weefsel
Nieren
Synoniemen
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Documenten

HEK293-F-cellen

Cell line · Productnummer 300260

HEK293-F-cellen zijn een snelgroeiende, zeer goed transfectabele sublijn die is afgeleid van de menselijke embryonale niercelijn 293 (HEK293). De aanduiding 'F' geeft aan...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HEK293-F cellen zijn een snelgroeiende, zeer transfecteerbare sublijn afgeleid van de menselijke embryonale nier 293 (HEK293) cellijn. De 'F'-aanduiding geeft aan dat deze cellen zijn aangepast voor groei in suspensieculturen, waardoor ze bijzonder geschikt zijn voor eiwitproductie op grote schaal. De cellen groeien in verschillende serumvrije media, wat schaalbare processen in biotechnologische en farmaceutische toepassingen vergemakkelijkt. HEK293-F cellen behouden de epitheelachtige morfologie van de ouderlijn HEK293 en worden in suspensie gehouden zonder dat ze aan een vast substraat hoeven te worden bevestigd.

Deze cellen zijn zeer efficiënt in het tot expressie brengen van recombinante eiwitten en worden veel gebruikt bij de productie van virale vectoren voor gentherapie, waaronder adenovirale, lentivirale en retrovirale vectoren. Door hun robuuste groei in suspensie en eenvoudige transfectie zijn ze ideaal voor gebruik in transiënte transfectieprotocollen, waarbij ze binnen een paar dagen na transfectie een hoge opbrengst aan eiwitten kunnen produceren. Dit kenmerk is cruciaal voor snelle productiecycli in onderzoek en industriële omgevingen. Het aanpassingsvermogen van HEK293-F cellen aan verschillende groeicondities en hun capaciteit voor high-density kweek vergroten hun bruikbaarheid in bioprocessing omgevingen.

Weefsel
Nieren
Toepassingen
Transfectiegastheer
Synoniemen
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
In naakte muizen
Verdubbelingstijd
30 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HEK293-F (Cytion catalogusnummer 300260)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Vitronectine
Eiwit-expressie
CEA negatief, p53 positief
Virussen
Getransformeerd met adenovirus 5 DNA adenovirus 5 DNA

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
CD293 (Thermo)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 zal in ongeveer 4 dagen een confluente laag opleveren.
Vloeistofverversing
2 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Foetus