Skip to content
Tế bào HEK293-F
Tissue
Thận
Synonyms
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Documents

Tế bào HEK293-F

Cell line · Product number 300260

HEK293-F cells are a fast-growing, highly transfectable subline derived from the human embryonic kidney 293 (HEK293) cell line. The 'F' designation indica...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào HEK293-F là một dòng tế bào con phát triển nhanh, có khả năng chuyển gen cao, được phân lập từ dòng tế bào thận phôi người 293 (HEK293). Ký hiệu 'F' cho biết các tế bào này đã được thích nghi để phát triển trong môi trường nuôi cấy treo lơ lửng, làm cho chúng đặc biệt hữu ích cho sản xuất protein quy mô lớn. Các tế bào này phát triển trong nhiều loại môi trường không chứa huyết thanh, giúp thuận lợi cho các quy trình có thể mở rộng trong các ứng dụng công nghệ sinh học và dược phẩm. Tế bào HEK293-F giữ nguyên hình thái biểu mô tương tự như dòng tế bào HEK293 gốc và có thể duy trì trong môi trường treo mà không cần bám dính vào chất nền rắn.

Các tế bào này có hiệu suất cao trong việc biểu hiện protein tái tổ hợp và được sử dụng rộng rãi trong sản xuất véc-tơ virus cho liệu pháp gen, bao gồm véc-tơ adenovirus, lentivirus và retrovirus. Khả năng phát triển mạnh mẽ trong môi trường treo lơ lửng và dễ dàng chuyển gen khiến chúng trở thành lựa chọn lý tưởng cho các quy trình chuyển gen tạm thời, nơi chúng có thể sản xuất lượng protein cao chỉ sau vài ngày sau khi chuyển gen. Đặc điểm này là yếu tố quan trọng cho các chu kỳ sản xuất nhanh trong môi trường nghiên cứu và công nghiệp. Khả năng thích ứng của tế bào HEK293-F với các điều kiện phát triển khác nhau và khả năng nuôi cấy mật độ cao của chúng làm tăng tính ứng dụng của chúng trong môi trường xử lý sinh học.

Tissue
Thận
Applications
Vật chủ cho quá trình chuyển gen
Synonyms
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Ở chuột không lông
Doubling time
30 giờ

04Identifiers

Citation
HEK293-F (Số catalog Cytion 300260)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Vitronectin
Protein expression
CEA âm tính, p53 dương tính
Viruses
Được biến đổi bằng DNA của adenovirus 5 DNA của adenovirus 5

06Handling and culture

Culture medium
CD293 (Thermo)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 x 10⁴ tế bào/cm² sẽ tạo thành một lớp tế bào dày đặc trong khoảng 4 ngày.
Fluid renewal
2 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
Thai nhi