Sel HEK293

Garis sel HEK293, garis sel epitel yang diabadikan yang berasal dari sel ginjal embrionik manusia pada tahun 1970-an oleh Alex van der Eb di University of Utrecht, telah menjadi model eksperimental yang sangat penting dalam biologi molekuler dan aplikasi bioteknologi karena keserbagunaannya yang luar biasa dan kemudahan manipulasi genetik.

Transformasi garis sel HEK293 melibatkan integrasi segmen spesifik dari DNA Adenovirus 5, yang menanamkan gen adenoviral E1A dan E1B di dalam genom seluler. Modifikasi DNA adenoviral memungkinkan kemampuan garis sel untuk menyerap DNA asing secara efisien, sebuah fitur yang dikenal sebagai efisiensi transfeksi yang tinggi. Integrasi DNA virus ke dalam genom sel HEK293 menghasilkan pengabadian sel dan secara signifikan meningkatkan kegunaan sel-sel ini dalam aplikasi bioteknologi dengan memfasilitasi penggabungan yang stabil dan ekspresi DNA eksogen, sebuah proses yang disebut transfeksi stabil. Kemampuan ini memungkinkan keberadaan dan fungsi gen asing yang terus-menerus di dalam sel, menjadikan HEK293 alat yang sangat berharga untuk studi genetik dan bioteknologi.

Sebagai hasilnya, sel HEK293 telah menjadi sumber daya mendasar dalam bioteknologi untuk produksi protein rekombinan, termasuk protein terapeutik yang penting, dan berfungsi sebagai sel inang yang kuat untuk menghasilkan vektor virus, terutama vektor adenovirus dan lentivirus. Sel HEK 293 sangat penting dalam industri farmasi untuk uji skrining dengan hasil yang tinggi, pembuatan terapi gen yang menargetkan gen spesifik yang terkait dengan kelainan gen tunggal, dan studi infeksi adenoviral.

Dalam bioteknologi industri, kegunaan garis sel manusia HEK293 meluas ke produksi enzim rekombinan, produksi vektor virus, seperti vektor adenoviral, produksi protein, dan pengembangan biosensor. Penelitian toksikologi mendapat manfaat dari penerapan garis sel HEK dalam menilai dampak bahan kimia pada biologi sel, termasuk efek pada sel ginjal yang khas dan potensi terapi gen. Kemampuan garis sel abadi HEK293 untuk secara efisien memproduksi protein asli menyoroti peran penting mereka dalam penelitian medis, termasuk penelitian kanker dan mengeksplorasi dasar-dasar terapi gen.

Sel HEK293 menawarkan platform unik untuk mempelajari biologi sel dan protein yang diminati, melampaui garis sel lain dalam hal keserbagunaan dan kegunaan dalam penelitian dan aplikasi industri. Sebagai perbandingan, sel HEK293T, varian dari HEK293, dimodifikasi untuk meningkatkan efisiensi transfeksi, sel HEK293F diadaptasi untuk kultur suspensi untuk memfasilitasi produksi protein skala besar, dan garis sel mamalia lainnya seperti sel Vero, yang berasal dari jaringan ginjal kera, terutama digunakan dalam pengembangan vaksin dan studi virus.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami