Células HEK293 EBNA

La línea celular HEK293 EBNA es un derivado de la línea HEK293 original, la cual a su vez se derivó de células renales embrionarias humanas cultivadas en cultivo de tejidos. Esta sublínea en particular fue modificada genéticamente para expresar de manera estable el antígeno nuclear 1 del virus de Epstein-Barr (EBNA-1). La expresión de EBNA-1 permite la replicación episomal de plásmidos que portan el origen de replicación del VEB, lo que hace que las células HEK293 EBNA sean particularmente valiosas para la producción de proteínas recombinantes y para estudios de expresión génica que involucren vectores episomales.

Las células HEK293 EBNA conservan muchas de las características de las células HEK293 originales, incluida su adherencia al plástico de cultivo celular y su crecimiento robusto en medios estándar de cultivo de células mamíferas. La incorporación de EBNA-1 amplía su utilidad en la investigación y en aplicaciones biotecnológicas, ya que mejora la capacidad de las células para propagar plásmidos con el origen de replicación del VEB. Esta característica es fundamental para producir proteínas recombinantes estables y de alto rendimiento, lo cual es esencial tanto para fines de investigación como para la producción a escala industrial.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.