Prejsť na obsah
Bunky HEK293 EBNA
Tkanivo
Embryonálna oblička
Synonymá
HEK293-EBNA, 293 c18, 293c18, HEK 293 c18, HEK-293 c18, HEK293-EBNA1, HEK-293-EBNA, HEK 293-EBNA, HEK 293 EBNA, HEK293EBNA, 293 EBNA, 293-EBNA1, 293-EBNA, 293/EBNA, 293EBNA, EBNA-293, EBNA293, HEK293E, HEK/EBNA, HEK-EBNA, HEK.EBNA, 293/EBNA-1, 298E

Dokumenty

Bunky HEK293 EBNA

Cell line · Číslo výrobku 300264

Bunková línia HEK293 EBNA je derivátom pôvodnej línie HEK293, ktorá sama pochádza z ľudských embryonálnych obličkových buniek kultivovaných v tkanivovej kultúre....

€650.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia HEK293 EBNA je derivátom pôvodnej línie HEK293, ktorá bola odvodená z buniek ľudských embryonálnych obličiek pestovaných v tkanivovej kultúre. Táto konkrétna sublínia bola vytvorená tak, aby stabilne exprimovala jadrový antigén-1 vírusu Epsteina-Barrovej (EBNA-1). Expresia EBNA-1 umožňuje epizomálnu replikáciu plazmidov, ktoré nesú pôvod replikácie EBV, vďaka čomu sú bunky HEK293 EBNA obzvlášť cenné na produkciu rekombinantných proteínov a na štúdie génovej expresie zahŕňajúce epizomálne vektory.

Bunky HEK293 EBNA si zachovávajú mnohé vlastnosti materských buniek HEK293 vrátane ich priľnavosti na plastové bunkové kultúry a ich robustného rastu v štandardných médiách pre bunkové kultúry cicavcov. Pridanie EBNA-1 rozširuje ich využiteľnosť vo výskume a biotechnologických aplikáciách, pretože zvyšuje schopnosť buniek rozmnožovať plazmidy s pôvodom replikácie plazmidu EBV. Táto vlastnosť je rozhodujúca pre produkciu stabilných rekombinantných proteínov s vysokou výťažnosťou, čo je nevyhnutné na výskumné účely aj priemyselnú výrobu.

Tkanivo
Embryonálna oblička
Synonymá
  • HEK293-EBNA
  • 293 c18
  • 293c18
  • HEK 293 c18
  • HEK-293 c18
  • HEK293-EBNA1
  • HEK-293-EBNA
  • HEK 293-EBNA
  • HEK 293 EBNA
  • HEK293EBNA
  • 293 EBNA
  • 293-EBNA1
  • 293-EBNA
  • 293/EBNA
  • 293EBNA
  • EBNA-293
  • EBNA293
  • HEK293E
  • HEK/EBNA
  • HEK-EBNA
  • HEK.EBNA
  • 293/EBNA-1
  • 298E

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This HEK293 EBNA cell line contains EBV nuclear antigen (EBNA) sequences enabling episomal replication of EBV-derived plasmids, without releasing infectious virus particles. The modification is stably present in embryonic kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
HEK293 EBNA (katalógové číslo Cytion 300264)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6974

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
EBNA1
Vírusy
Adenovírus 5 (transformant), EBV (exprimuje EBNA1)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Plod