İçeriğe atla
HEK293 suspension-adapted
Doku
Böbrek

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Ürün numarası 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HEK293 süspansiyona uyarlanmış hücre hattı, insan embriyonik böbrek 293 (HEK293) hücrelerinin yapışık kültür yerine süspansiyon kültüründe büyümek üzere modifiye edilmiş bir çeşididir. Bu adaptasyon, büyük ölçekli protein üretiminin gerekli olduğu endüstriyel uygulamalar için önemlidir. Hücreler, sağlam bir geçici transfeksiyon verimliliği ve ifade edilen proteinleri doğal insan hücrelerine benzer bir şekilde post-translasyonel olarak değiştirme yeteneği de dahil olmak üzere orijinal HEK293 hattının birçok özelliğini korumaktadır.

Bu hücreler özellikle biyoteknoloji ve ilaç endüstrilerinde gen terapisi ve aşı geliştirmeye yönelik rekombinant proteinlerin ve virüslerin üretimi için değerlidir. Süspansiyon kültürüne adaptasyon daha kolay ölçeklenebilirlik sağlar ve hasat sürecini basitleştirerek ticari ölçekli biyoişleme için daha uygun hale getirir. HEK293 süspansiyona uyarlanmış hücre hattı, terapötik uygulamalar ve araştırmalarda çok önemli olan adenovirüs, lentivirüs ve adeno-ilişkili virüs (AAV) dahil olmak üzere çeşitli viral üretim sistemlerini destekler.

Genel olarak, HEK293 süspansiyona uyarlanmış hücre hattı, moleküler biyoloji ve biyoproses alanlarında çok önemli bir araçtır ve çeşitli biyolojik olarak aktif moleküllerin üretimi için çok yönlü bir platform sağlar. Genetik manipülasyon kolaylığı ve insan hücre modellerine göre doğru katlanmış ve post-translasyonel olarak modifiye edilmiş proteinler üretme yeteneği, onu birçok gelişmiş terapötik ve araştırma ortamında vazgeçilmez bir kaynak haline getirmektedir.

Doku
Böbrek
Uygulamalar
Transfeksiyon konağı

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Askıya alma
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Yuvarlak
Tümör oluşturucu
Çıplak farelerde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HEK293 süspansiyona uyarlanmış (Cytion katalog numarası 300686)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Vitronektin
Protein ekspresyonu
CEA negatif, p53 pozitif
Virüse karşı duyarlılık
Adenovirüs 5 DNA'sı ile dönüştürülmüş adenovirüs 5 DNA'sı

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Panserin 293S (PanBiotech, Almanya)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Takviye gerekmez
Ayrıştırma reaktifi
Gerekli değil
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücrelerini, 37°C/5% CO2'lik bir inkübatör içindeki çalkalayıcıda, Eppendorf hücre kültürü şişelerinde 5 x 105 ile 2-3 x 106 hücre/ml arasında hücre yoğunluklarında muhafaza edin. Hücre yoğunluğu 2-3 x 106 hücre/ml'ye ulaştığında alt kültüre alın. Hücrelerin kümelenmesini önlemek için dikkatlice ayırın. Hücre yoğunluğu 1-2 x 106 hücre/ml'ye ulaştığında, hücreleri 200xg'de 5 dakika santrifüjleyerek toplayın ve süpernatantı atın. Uygun hacimde taze, önceden ısıtılmış kültür ortamı ile seyreltin ve hücrelerin canlılığı ve sayısı hakkında bilgi edinmek için hücreleri sayın. Hücreleri 200xg'de 5 dakika santrifüjleyerek toplayın ve süpernatantı atın. Hücreleri uygun hacimde dondurma ortamında yeniden süspansiyon haline getirin ve bir kez daha sayın. Hücre canlılığı >>%80 olmalıdır, 5-10 milyon hücre/ml hücre yoğunluğu önerilir. Hücreleri önceden etiketlenmiş kriyoviyallere pipetleyin. 1°C/dk soğutma hızını sağlamak için CoolCell dondurma kabı veya kontrollü hızda dondurucu kullanın.
Ekim yoğunluğu
5 x 105 hücre/ml
Çözülme sonrası toparlanma
Kültürleri 5 x 105 hücre/ml yoğunlukta başlatın ve optimum büyüme için hücre konsantrasyonunu 2-3 x 106 hücre/ml seviyesinde tutun. 37°C/5% CO2'de 100-150 rpm hızında bir hücre çalkalayıcıda inkübe edin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Fetüs