HEK293 suspension-adapted
Cell line · Toote number 300686
The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...
Kohandamine / Soovitused
- HEK293 suspension-adaptedCell line€500.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
HEK293 suspensiooniga kohandatud rakuliin on inimese embrüonaalse neeru 293 (HEK293) rakkude variant, mis on modifitseeritud, et kasvada pigem suspensioonikultuuris kui kleepuvas kultuuris. See kohandamine on oluline tööstuslike rakenduste jaoks, kus on vaja laiaulatuslikku valkude tootmist. Rakud säilitavad paljud algse HEK293 liini omadused, sealhulgas tugeva transfektsioonitõhususe ja võime ekspresseeritud valke translatsioonijärgselt muuta sarnaselt emakeelega inimrakkudega.
Neid rakke hinnatakse eriti kõrgelt biotehnoloogia- ja farmaatsiatööstuses rekombinantsete valkude ja viiruste tootmiseks geeniteraapia ja vaktsiinide arendamiseks. Kohandamine suspensioonikultuuriga võimaldab kergemat skaleeritavust ja lihtsustab koristusprotsessi, muutes selle sobivamaks tööstuslikuks biotöötluseks. HEK293 suspensiooniga kohandatud rakuliin toetab erinevaid viiruste tootmissüsteeme, sealhulgas adenoviirust, lentiviirust ja adeno-assotsieerunud viirust (AAV), mis on terapeutilistes rakendustes ja teadusuuringutes keskse tähtsusega.
Üldiselt on HEK293 suspensiooniga kohandatud rakuliin oluline vahend molekulaarbioloogia ja biotöötluse valdkonnas, pakkudes mitmekülgset platvormi erinevate bioloogiliselt aktiivsete molekulide tootmiseks. Selle lihtne geneetiline manipuleeritavus ja võime toota valke, mis on korrektselt volditud ja translatsioonijärgselt modifitseeritud vastavalt inimese rakumustritele, muudavad selle asendamatuks ressursiks paljudes täiustatud terapeutilistes ja teaduslikes tingimustes.
- Kude
- Neerud
- Rakendused
- Transfektsiooni peremees
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Vedrustus
- GMO-staatus
- GMO-S1
- GMO-staatuse üksikasjad
- GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Ümmargune
- Tuumorigeenne
- Alasti hiirtel
04Tunnused
- Viide
- HEK293 suspensiooni adapteeritud (Cytion katalooginumber 300686)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0045
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Ekspresseeritud retseptorid
- Vitronektiin
- Valgu ekspressioon
- CEA negatiivne, p53 positiivne
- Viirusele vastuvõtlikkus
- Transformeeritud adenoviiruse 5 DNAga adenoviiruse 5 DNAga
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- Panserin 293S (PanBiotech, Saksamaa)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendused ei ole vajalikud
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Ei nõuta
- Kultuuri edasikasvatamine
- Hoidke suspensioonrakke rakutihedusega 5 x 105 kuni 2-3 x 106 rakku/ml Eppendorfi rakukultuurikolvides inkubaatoris 37 °C juures ja 5% CO2 sisaldusega. Kui rakutihedus on jõudnud 2-3 x 106 rakku/ml, tehke subkultuur. Eemaldage rakud ettevaatlikult, et vältida klastrite tekkimist. Kui rakkude tihedus on 1–2 x 106 rakku/ml, koguge rakud tsentrifuugides 200xg 5 minutit ja visake supernatant ära. Lahjendage sobivas koguses värskes, eelsoojendatud kultuurikeskkonnas ja loendage rakud, et saada teavet rakkude eluvõimelisuse ja arvu kohta. Koguge rakud 200xg juures 5 minutit tsentrifuugides ja visake supernatant ära. Resuspendeerige rakud sobivas koguses külmutuskeskkonnas ja loendage uuesti. Rakkude eluvõimelisus peaks olema >>80%, soovitatav on rakutihedus 5–10 miljonit rakku/ml. Pipeteerige rakud eelnevalt märgistatud külmutusproovivõtturitesse. Kasutage CoolCell külmutuskonteinerit või kontrollitud kiirusega külmutit, et tagada jahutuskiirus 1 °C/min.
- Külvitihedus
- 5 x 105 rakku/ml
- Taastumine pärast sulamist
- Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon optimaalse kasvu tagamiseks 2–3 x 106 rakku/ml. Inkubeerige 37 °C juures/5% CO2 rakukatseaparaadis kiirusel 100–150 rpm.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- Loote
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah






.jpg)
