HEK293-VEGFR2

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Las células HEK293-VEGFR2 son células renales embrionarias humanas 293 (HEK293) modificadas genéticamente para expresar de manera estable el receptor 2 del factor de crecimiento endotelial vascular humano (VEGFR2/KDR/Flk-1), una tirosina quinasa receptora que actúa como mediador principal de la señalización angiogénica impulsada por el VEGF. El VEGFR2 se expresa principalmente en las células endoteliales y desempeña un papel esencial en el desarrollo vascular, la proliferación, la migración, la permeabilidad y la supervivencia de las células endoteliales mediante la activación de vías de señalización posteriores, como las cascadas de señalización de las familias MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ y SRC. La desregulación de la señalización de VEGFR2 contribuye a la angiogénesis tumoral, la remodelación vascular inflamatoria y la neovascularización patológica, lo que convierte al receptor en un objetivo principal en la terapia oncológica y de enfermedades vasculares.

Las células HEK293-VEGFR2 se utilizan ampliamente en la investigación sobre la angiogénesis y el descubrimiento de fármacos para la caracterización de anticuerpos monoclonales dirigidos contra el VEGFR2, inhibidores de la tirosina quinasa, trampas de ligandos, anticuerpos biespecíficos y productos biológicos antiangiogénicos. El sistema de expresión recombinante estable permite la evaluación cuantitativa de la unión del ligando del VEGF, la fosforilación del receptor, la activación de la señalización posterior, la internalización del receptor y la potencia de los inhibidores. Estas células también se emplean comúnmente en ensayos de reportero, estudios de unión basados en citometría de flujo, ensayos de actividad de cinasa y flujos de trabajo de cribado terapéutico de alto rendimiento. Dado que las células HEK293 permiten una expresión robusta de proteínas recombinantes y una propagación eficiente, proporcionan una plataforma confiable para el desarrollo de ensayos estandarizados de VEGFR2 y estudios de los mecanismos de señalización.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Después de la descongelación, divida las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en frascos T25 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.

Para lograr una mejor adhesión y viabilidad después de descongelar las células, recomendamos utilizar frascos o placas recubiertas de colágeno para la siembra inicial tras la criorecuperación. El recubrimiento de colágeno no es necesario para el cultivo rutinario posterior de las células.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.