HROG17 T1 M1

HROG17 T1 M1 est une lignée cellulaire humaine primaire de glioblastome multiforme (GBM) établie à partir d’un échantillon tumoral prélevé chez un patient adulte chez qui un glioblastome de grade IV selon la classification de l’OMS avait été diagnostiqué. La désignation « T1 » indique que l’échantillon a été prélevé lors de la première intervention chirurgicale, tandis que « M1 » désigne le modèle in vitro correspondant dérivé de cette tumeur. La lignée cellulaire a été générée au sein de la plateforme HROG (Hansestadt Rostock Glioma), qui se consacre à l’établissement de cultures de gliomes à très faible nombre de passages préservant les caractéristiques moléculaires et phénotypiques spécifiques au patient.

La lignée HROG17 T1 M1 se développe en adhésion dans des conditions de culture standard et présente une morphologie de type fibroblastique typique des cultures primaires de GBM. La caractérisation immunophénotypique des lignées dérivées de HROG démontre l’expression de marqueurs associés aux lignées gliales et neurales, tels que la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP), la nestine et la vimentine, ce qui concorde avec une origine tumorale astrocytaire de haut grade. Le profilage moléculaire au sein de la collection HROG comprend l’évaluation de paramètres cliniquement pertinents, tels que la méthylation du promoteur MGMT, le statut d’amplification de l’EGFR et l’analyse des mutations de gènes clés, notamment TP53, IDH1/2, KRAS et BRAF, ce qui confirme la conservation des altérations génomiques spécifiques à la tumeur en culture.

Le modèle HROG17 T1 M1 a été utilisé pour évaluer la sensibilité aux agents de référence dans le traitement du glioblastome, notamment les agents chimiothérapeutiques alkylants et d’autres composés ciblés. Des analyses comparatives entre les différents modèles HROG indiquent que les cultures à faible nombre de passages conservent une morphologie, une cinétique de croissance et des profils de réponse aux médicaments stables au cours des premiers passages. En tant que modèle de glioblastome dérivé de patient et à faible nombre de passages, HROG17 T1 M1 offre une plateforme in vitro cliniquement pertinente pour l’étude de la biologie tumorale, de la réponse thérapeutique et de l’hétérogénéité intertumorale dans les gliomes de haut grade.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.