HROG17 T1 M1

HROG17 T1 M1 é uma linhagem celular primária de glioblastoma multiforme (GBM) humano, estabelecida a partir de uma amostra tumoral ressecada de um paciente adulto diagnosticado com glioblastoma de grau IV segundo a classificação da OMS. A designação “T1” indica que a amostra foi obtida no primeiro momento cirúrgico, enquanto “M1” denota o modelo in vitro correspondente derivado desse tumor. A linhagem celular foi gerada na plataforma HROG (Hansestadt Rostock Glioma), que se concentra no estabelecimento de culturas de glioma com número ultrabaixo de passagens que preservam as características moleculares e fenotípicas específicas do paciente.

A HROG17 T1 M1 cresce de forma aderente em condições padrão de cultura e apresenta uma morfologia semelhante à dos fibroblastos, típica de culturas primárias de GBM. A caracterização imunofenotípica das linhagens derivadas da HROG demonstra a expressão de marcadores associados às linhagens glial e neural, tais como a proteína ácida fibrilar glial (GFAP), nestina e vimentina, o que é consistente com a origem de um tumor astrocítico de alto grau. O perfil molecular da coleção HROG inclui a avaliação de parâmetros clinicamente relevantes, como a metilação do promotor de MGMT, o status de amplificação do EGFR e a análise mutacional de genes-chave, incluindo TP53, IDH1/2, KRAS e BRAF, comprovando a retenção de alterações genômicas específicas do tumor em cultura.

O HROG17 T1 M1 tem sido utilizado para avaliar a sensibilidade a agentes de tratamento padrão para o glioblastoma, incluindo quimioterápicos alquilantes e compostos direcionados adicionais. Análises comparativas entre os modelos HROG indicam que culturas de baixa passagem mantêm morfologia, cinética de crescimento e perfis de resposta a medicamentos estáveis ao longo das primeiras passagens. Como modelo de glioblastoma derivado de paciente e de baixa passagem, o HROG17 T1 M1 oferece uma plataforma in vitro clinicamente relevante para o estudo da biologia tumoral, da resposta terapêutica e da heterogeneidade intertumoral no glioma de alto grau.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.