Skip to content
HROG17 T1 M1
Tissue
מוח
Disease
גליובלסטומה

Documents

HROG17 T1 M1

Cell line · Product number 300875

HROG17 T1 M1 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from a tumor specimen resected from an adult patient diagnosed with WH...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HROG17 T1 M1 הוא קו תאים ראשוני של גליובלסטומה מולטיפורמה (GBM) אנושית, שהוקם מדגימת גידול שהוצא מחולה בוגר שאובחן עם גליובלסטומה בדרגה IV על פי סיווג ארגון הבריאות העולמי (WHO). הסימון "T1" מציין שהדגימה נלקחה בניתוח הראשון, ואילו "M1" מציין את המודל המקביל במבחנה שנגזר מגידול זה. קו התאים נוצר במסגרת פלטפורמת HROG (Hansestadt Rostock Glioma), המתמקדת ביצירת תרבויות גליומה בעלות מעבר נמוך במיוחד, המשמרות את המאפיינים המולקולריים והפנוטיפיים הספציפיים למטופל.

HROG17 T1 M1 גדל באופן דבק בתנאי תרבית סטנדרטיים ומציג מורפולוגיה דמוית פיברובלסט האופיינית לתרבויות GBM ראשוניות. אפיון אימונופנוטיפי של קווי תאים שמקורם ב-HROG מדגים ביטוי של סמנים הקשורים לשושלת גליה ועצבית, כגון חלבון חומצי פיברילרי גליה (GFAP), נסטין ווימנטין, בהתאם למקור הגידול האסטרוציטי בדרגה גבוהה. הפרופיל המולקולרי באוסף HROG כולל הערכה של פרמטרים רלוונטיים קלינית, כגון מתילציה של מקדם MGMT, מצב הגברה של EGFR וניתוח מוטציות של גנים מרכזיים, כולל TP53, IDH1/2, KRAS ו-BRAF, התומכים בשימור שינויים גנומיים ספציפיים לגידול בתרבית.

HROG17 T1 M1 שימש להערכת הרגישות לתרופות סטנדרטיות לטיפול בגליובלסטומה, כולל כימותרפיה אלקילית ותרכובות ממוקדות נוספות. ניתוחים השוואתיים בין מודלים HROG מצביעים על כך שתרבויות בעלות מעבר נמוך שומרות על מורפולוגיה יציבה, קינטיקה של צמיחה ופרופילים של תגובה לתרופות לאורך המעברים המוקדמים. כמודל גליובלסטומה בעל מעבר נמוך שמקורו בחולים, HROG17 T1 M1 מספק פלטפורמה רלוונטית קלינית במבחנה לחקר הביולוגיה של הגידול, התגובה הטיפולית וההטרוגניות הבין-גידולית בגליומה בדרגה גבוהה.

Tissue
מוח
Disease
גליובלסטומה

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
HROG17 T1 M1 (מספר קטלוגי Cytion 300875)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FQ

04Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
TrypLE Express, 37°C, 10 דקות,
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

06Donor

Donor age
70 שנים
Ethnicity
קווקזי